歯周疾患の病態と各種サイトカインmRNA発現の関連性の検討

牙周病病理与多种细胞因子mRNA表达关系的探讨

• 批准号: 07771745
• 负责人: 野崎 剛徳
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771745/
• 关键词: 辺縁性歯周炎; サイトカイン; 微量歯肉組織穿刺採取法; RT-PCR

本研究において歯肉組織における各種炎症関連因子mRNA発現の検出に先だち、組織採取時の侵襲を最少とした微量歯肉組織穿刺採取法を開発した。同法を用いて採取した組織よりRNAを抽出し、RT-PCRを行うことにより、種々の因子の局所mRNA発現を同時に、半定量的に検出する系を確立した。多検体間における各種mRNA発現量の比較を行うにあたり、RT-PCRのテンプレートとなるcDNAの濃度の標準化が必要であるため、ハウスキーピング遺伝子であるGAPDHの194塩基対欠落変異DNAを作成し、各検体のcDNAと競合増幅することで検体中のGAPDH発現量を定量する系を確立した。これらの手法を用いて歯周炎の臨床的炎症所見と各種炎症関連因子mRNA発現の関連性を検討した。すなわち、大阪大学歯学部歯周病室を受診した成人歯周炎患者7名からインフォームドコンセントの後に臨床的に炎症所見を有する部位および健常な部位を各々一部ずつ選択し、歯肉組織局所における各種炎症関連因子mRNA発現の検出を行い臨床的炎症パラメータとの関連性を検討した。その結果、臨床的炎症所見の強く認められた部位では健常な部位と比較してIL-1α,β,IL-6、8、TNFα、IFNγおよびプロスタノイド合成の律速酵素であるCox-2-mRNA発現量が高い値を示すこと、健常部位でも数種の因子のmRNA発現量が上昇している部位が存在すること、および、これらのmRNA発現上昇は一様ではなく各部位により異なった上昇パターンを示すことが明らかになった。この上昇パターンの多様性は歯周組織局所の病態を反映しているものと考えられる。このことから、本研究で開発した手法を用いて複数の炎症関連因子mRNA局所発現の同時検出を行うことにより、歯周組織の多様な炎症像の鋭敏かつ詳細な解析が可能とり、今後の疾病活動度の研究に応用可能であることが示唆された。

This study に お い て 歯 meat organization に お け る inflammatory masato even factor mRNA 発 is の 検 out に だ first ち, organization take の installed を least と し た trace 歯 meat tissue biopsy taken method を open 発 し た. With law を い て take し た organization よ り RNA を spare し, rt-pcr を line う こ と に よ り, kind of 々 の factor の bureau mRNA 発 now を に at the same time, semi-quantitative に 検 out す を る department establish し た. Between more 検 に お け る various mRNA 発 line amount is の is を う に あ た り, rt-pcr の テ ン プ レ ー ト と な る cDNA の concentration の standardized が necessary で あ る た め, ハ ウ ス キ ー ピ ン グ heritage 伝 son で あ る GAPDH の salt base owe seaborne fall - 194 different DNA を made し, each 検 の cDNA と competition rights of す る こ と で The occurrence amount of <s:1> GAPDH in the 検 body を quantified する system を established <s:1> た. The <s:1> れら <s:1> technique を uses the clinical inflammatory findings of <s:1> て歯 periodontitis <e:1> と and the mRNA of various inflammation-related factors showing <s:1> correlation を検 to explore た. す な わ ち 歯, Osaka university division 歯 weeks ward を diagnosis し た 歯 adult patients with periarthritis seven か ら イ ン フ ォ ー ム ド コ ン セ ン ト の に after clinical に inflammation seen を have す る parts お よ び health often な parts を each 々 a ず つ sentaku し, 歯 meat organization bureau に お け る inflammatory masato even factor mRNA 発 is の 検 を row い inflammation of the clinical パ ラ メ ー タ Youdaoplaceholder0 と associative を検 discuss た. そ の results, clinical inflammation seen strong の く recognize め ら れ で た parts often は health な place と compare し て IL - 1 alpha, beta, IL - 6, 8, TNF alpha, IFN gamma お よ び プ ロ ス タ ノ イ ド speed of enzyme synthesis の law で あ る cox-2 - mRNA 発 now quantity on high が い numerical を shown す こ と and health often で も several の factor の mRNA 発 quantity now Rising が し て い が る parts exist す る こ と, お よ び, こ れ ら の mRNA 発 rise は a others now で は な く parts に よ り different な っ た rise パ タ ー ン を shown す こ と が Ming ら か に な っ た. The <s:1> <s:1> increase パタ パタ <s:1> <s:1> polymorphism 歯 歯 歯 weekly organizational bureau <e:1> pathology を reflects the <s:1> て る る <s:1> と examination えられる. こ の こ と か ら, this study で 発 し た gimmick を with い て plural の inflammation masato even factor mRNA bureau 発 now の as well as 検 を row う こ と に よ り, organization の 歯 weeks others な inflammation like の acuity か つ な detailed resolution が may と り disease activity, the future の の research に 応 may use で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

H.Okada: "Diagnostic strategies of periodontitis based on the molecular mechanisms of periodontal tissue destruction." Oral Disease. (発表予定). (1996)

H.Okada：“基于牙周组织破坏的分子机制的牙周炎诊断策略”（即将发表）。

H.Okada: "T cell functions in periodontal disease." Dtsch Zahnarztl Z. 50. 361-365 (1995)

H.Okada：“T 细胞在牙周病中发挥作用。”