インターフェロン誘導性RB・結合タンパク質のクローニング
干扰素诱导的RB/结合蛋白的克隆
基本信息
- 批准号:07772172
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1995
- 资助国家:日本
- 起止时间:1995 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
様々なヒト線維芽細胞を用いてインターフェロンによる細胞増殖の抑制時におけるRBのリン酸化および共沈タンパク質を免疫沈降法を用いて検討した。その結果、多くの線維芽細胞でRBのリン酸化が起こっているにも関わらず細胞増殖の抑制が観察された。これは、線維芽細胞においてインターフェロンによる細胞増殖抑制機構は、RBを介さない経路で起こっていることを示唆させる結果であった。さらに、インターフェロン処理した様々な線維芽細胞では約80KDa付近にRB抗体で免疫沈降されてくるタンパク質が検出された。つまり、80KDaのタンパク質が多くの細胞でインターフェロン処理によって誘導され、細胞増殖の抑制に関与している可能性が考えられた。この時、IFNβで処理した細胞ではDNA合成が抑制されていることも同時に確認している。これらの結果から、当研究の目的とするインターフェロン誘導性80KDaのタンパク質は様々な細胞で検出されたことから重要である可能性を確認できた。Two hybrid systemを用いてRBタンパク質と結合するタンパク質をクローニングするためRB融合タンパク質をDNA組換え法により作製した。スクリーニングに必要なインターフェロン処理TIG-3細胞由来のcDNA libraryをリンカープライマー法によって作製した。これらを用いRBと結合するタンパク質をスクリーニングしており、いくつかその候補が得られているがin vitroでのタンパク質相互作用の確認までには至っていない。今後、これらのクローンについて詳細に検討する予定である。
The inhibition of cell proliferation caused by the use of vitamin C in small thread-like germ cells was investigated by immunoprecipitation. As a result, the proliferation of RB cells was inhibited in many cells. The cell growth inhibition mechanism of the cell line and the RB cell line were investigated. In addition to the above, we also found that there was no significant difference between the two groups. The possibility of induction and inhibition of cell proliferation was examined for the 80KDa protein. When IFNβ is used, DNA synthesis is inhibited and confirmed. The results of this study were confirmed by the possibility of inducing 80KDa of DNA in cells. Two hybrid systems are manufactured using the RB fusion technique. The cDNA library of TIG-3 cell origin was prepared by the method of gene extraction. This is the first time that a candidate has been identified in a vitro for a qualitative interaction. In the future, we will discuss in detail the future.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hidetoshi Tahara: "Increase in expression levels of interferon-inducible genes in senescent human diploid fibroblasts and in SV40-transformed human fibroblasts with extended lifespan" Oncogene. 11. 1125-1132 (1995)
Hidetoshi Tahara:“衰老人二倍体成纤维细胞和寿命延长的 SV40 转化人成纤维细胞中干扰素诱导基因的表达水平增加”Oncogene。
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- 影响因子:0
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- 影响因子:0
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- 发表时间:
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