プロトンポンプの胃壁細胞における特異的転写と細胞内輸送機構の解析

胃壁细胞质子泵特异性转录及胞内转运机制分析

• 批准号: 07780536
• 负责人: 岡 敏彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780536/
• 关键词: 組織特異的転写制御; GATA-GT1; GATA-GT2; 胃粘膜細胞

転写因子GATA-GT1またはGATA-GT2と相互作用するタンパク質の検索を目的として、本年度の研究行なった。具体的には以下の示す。1、融合タンパク質を用いた因子の検索:GATA-GT1、GATA-GT2と直接的に相互作用するタンパク質を調べるために、HA(ヘマグルチニン)タグを付けたGATA-GT1またはGATA-GT2との融合タンパク質を大腸菌で大量に調製した。そのれら融合タンパク質をプローブとして、胃粘膜組織より調製したcDNAライブラリーの発現系を用いて、相互作用するタンパク質の分離を行なっている。現在までに、2つの陽性クローンを分離できた。さらに、この方法によるクローンの分離を進めるとともに現在得ているクローンについても詳細に解析していく予定である。2、酵母two-hybrid法を用いた因子の検索:GATA-GT1、GATA-GT2と直接的に相互作用するタンパク質を調べるために、酵母GAL4のDNA結合ドメインとGATA-GT1又はGATA-GT2との融合タンパク質を酵母内で発現させ、それに結合しうる因子をtwo-hybrid法により検索した。現在、胃粘膜組織より調製したcDNAライブラリーの調製が終わり、スクリーニングを開始した。今後、このスクリーニングにより得たクローンをさらに解析してゆき、GATA-GT1、GATA-GT2の転写活性化の機構に関与している因子の役割を明らかにしていく。

Planning to write factors GATA - GT1 ま た は GATA - GT2 と interaction す る タ ン パ ク qualitative の 検 cable を purpose と し て line, this year's の research な っ た. The specific に に is shown below す. 1, fusion タ ン パ ク qualitative を with い た factor の 検 suo: GATA - GT1, GATA - GT2 と interact directly に す る タ ン パ ク qualitative を adjustable べ る た め に, HA (ヘ マ グ ル チ ニ ン) タ グ を pay け た GATA - GT1 ま た は GATA - GT2 と の fusion タ ン パ ク qualitative を coliform で large に modulation し た. そ の れ ら fusion タ ン パ ク qualitative を プ ロ ー ブ と し て, gastric mucosa tissue よ り modulation し た cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の 発 practice while department を い て, interaction す る タ ン パ ク の the separation line を な っ て い る. Now までに, 2 までに <s:1> positive <s:1> ロ を を を を を separation で た た た た た. さ ら に, こ の way に よ る ク ロ ー ン の separation を into め る と と も に now have て い る ク ロ ー ン に つ い て も detailed analytical し に て い く designated で あ る. 2, yeast two hybrid method を with い た factor の 検 suo: GATA - GT1, GATA - GT2 と interact directly に す る タ ン パ ク qualitative を adjustable べ る た め に, yeast GAL4 の dna-binding ド メ イ ン と GATA - GT1 and は GATA - GT2 と の fusion タ ン パ ク qualitative を yeast within で 発 now さ せ, Youdaoplaceholder0 combined with the うる factor をtwo-hybrid method によ 検 検 seek た. Now, gastric mucous membrane organization よ り modulation し た cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の modulation が eventually わ り, ス ク リ ー ニ ン グ を began し た. In the future, こ の ス ク リ ー ニ ン グ に よ り have た ク ロ ー ン を さ ら に parsing し て ゆ き, GATA - GT1, GATA - GT2 の planning write activeness の institutions に masato and し て い る factor cut を Ming ら の service か に し て い く.

项目成果

T.Nishi,et al: "Identification of the promoter region of the human histamine H_2-receptor gene." Biochem.and Biophys.Res.commun.210. 616-623 (1995)

T.Nishi 等人：“人类组胺 H_2 受体基因启动子区域的鉴定。”