胃におけるGATA転写因子の制御機構とクロライドイオン輸送の解析

GATA转录因子与胃内氯离子转运调控机制分析

• 批准号: 09780575
• 负责人: 岡 敏彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780575/
• 关键词: GATA-GT1; GT2; クロライドイオン; 組織特異的転写制御; GATE-GT1

本年度の研究行なった。具体的には以下の示す。1、 転写囚子GATA-GTlまたはGATA-GT2と相互作用するタンパク質の検索融合タンパク質を用いた因子の検索:GATA-GTl、GATA-GT2と直接的に相互作用するタンパク質を調べるために、HA(ヘマグルチニン)タグを付けたGATA-GTlまたはGATA-GT2との融合タンパク質を大腸菌で大量に調製した。そのれら融合タンパク質をプローブとして、胃粘膜組織より調製したcDNAライブラリーの発現系を用いて、相互作用するタンパク質の分離を行なった。スクリーニングにより複数の陽性クローンを分離し、その塩基配列の決定した。幾つかの新規のクローンの中に、ノーザンブロットなどにより組織特異的発現が観察されるものがあった。現在は酵母Two-hybrid法滋を用いて相互作用に必要な領域を検討中である。2、 胃におけるクロライドイオンの輸送とそのチャンネルの同定胃のクロライドチャンネルを同定するために、アフリカツメガエルの卵を用いた発現クローニングを行なった。胃粘膜より調製したcDNAをアフリカツメガエルの卵に打ち込み、クロライドイオンの透過を電気生理学的に測定したが、これまでに特異的なクローンは得られていない。胃粘膜のcDNAの再調製と測定感度について再度検討しなおしたが、チャンネル活性を示すクローンは同定できなかった。

This year's research is conducted. Specific information is shown below. 1. GATA-GT1 and GATA-GT2 interact with each other, and GATA-GT1 and GATA-GT2 interact with each other directly, and GATA-GT2 and GATA-GT2 interact with each other directly. In addition, the fusion protein and protein of gastric mucosa tissue are modulated by cDNA and the interaction protein and protein are separated. The separation of the positive and negative elements in the matrix is determined by the matrix arrangement. A few new rules are in place, and the organization's specific findings are observed. Now the yeast Two-hybrid method is used to interact with the necessary fields. 2. The transmission of information from the stomach to the heart is the same as that from the stomach to the heart. The gastric mucosa is modulated by cDNA, which is transmitted through electrophysiology. The re-modulation of gastric mucosa cDNA and the determination of sensitivity are discussed again.