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神経組織に特異的に発現するミオシンの機能の解明

阐明神经组织中特异性表达的肌球蛋白的功能

基本信息

批准号：
07780524
负责人：
高橋正行
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780524/
关键词：
ミオシンアイソフォーム非筋細胞神経組識組織特異的発現

项目摘要

非筋細胞ミオシン重鎖のアイソフォームであるMHC-Bのアクチン結合部位に神経組織特異的に発現しているB1インサーションの機能を明らかにすることを目的として、今年度は以下の実験を行った。(1)インサーション部分に相当する12merペプチドを認識するポリクローナル抗体を用いて、ラットの脳組織の各領域より抽出したタンパク質画分のWestern blottingを行った。以前我々は、ニワトリ及びラットにおいてはB1インサーションを含むミオシンが脳内でも小脳、脳幹部等の古い脳と呼ばれる部位で多く発現することを見いだしたが、その後1toh等によりHumanでは小脳よりも大脳においてB1の発現が多いという報告があった。そこでラットの大脳をさらに細かく分離しB1の発現量を調べたところ、大脳皮質、脳下垂体、眼神経、また嗅葉においてもB1の発現は非常に少ないということがわかった。また脳下垂体と嗅葉でB1を含まないMHC-Bが他の脳内の領域よりも多く発現していることがわかった。(2)細胞性粘菌Dictyostelium discoideumのミオシン重鎖を欠失する変異体に、HumanのB1インサーションを重鎖に持つミオシンを大量発現させる実験をスタートした。現在、粘菌のミオシン重鎖をコードするcDNAを持つプラスミドの50K-20K接合部位の配列をHumanのMHC-Bの配列に組み換えたプラスミドを作成できたところで、さらに、B1インサーション部分を組み込み、粘菌のミオシンも含めて3種のミオシンを大量発現しミオシンの性質を比較しB1インサーションが挿入された影響を検討する予定である。

Non-muscle cell ミオシン re-locking のアイソフォームであるMHC-B のアクチン binding site に神経 tissue-specific expressionしているB1 インサーションの Function を明らかにすることをPurpose として、This year's は and below の実験を行った. (1)インサーション partiallyに considerable する12merペプチドを知するポリクローナルAntibodies are used in various fields, such as いて and ラットの脳 tissue, and より is extracted and the quality is analyzed by Western blottingを行った. In the past, I was a 々は, a ニワトリ and a びラットにおいてはB1インサーションをThere are many parts of the むミオシンが脳内でも小脳, 脳cadres, etc.く発成することを见いだしたが、その后1tohwaitによりHumanでは小脳よりも大脳においてB1の発appearが多いという report があった.そこでラットの大脳をさらに Fine かくSeparationしB1の発真人を Adjustmentべたところ、大脳Cortex、脳The pituitary gland, the eye socket, the smell of the leaves, the smell of the leaves, and the B1's appearance are very small.また脳 Hypophyseal gland と sniffing leaf で B1 を contains まない MHC-B がの脳内の field よりも多く発appear しいることがわかった. (2) Cellular slime mold Dictyostelium discoideumのミオシン Heavy lockをowed lossする変different bodyに、HumanのB1インサーションを Heavy locks にhold つミオシンをA large number of 発appears させる実験をスタートした. Now, slime mold のミオシン relock をコードするcDNA をhold つプラスミドの50K-20K joint part Bit の arrangement を Human MHC-B の arrangement に group みえプラスミドを made できたところで, さらに, B1 インサーション partial を group み込み, slime mold のミオシンもcontaining めて 3 kinds of のミオシンを a lot The nature of the present しミオシンの comparative しB1 インサーションが insertion された influence を検する predetermined である.