カニクイザルにおけるアミロイド遺伝子の変異と脳内の老人斑形成との関連

淀粉样蛋白基因突变与食蟹猴大脑老年斑形成的关系

• 批准号: 07780750
• 负责人: 針原 伸二
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780750/
• 关键词: アミロイドβタンパク; BPP遺伝子; 老人斑; カニクイザル; STR多型; RFLPs; 制限酵素EcoRI; 発現実験

アミロイドβタンパク(BP)は,ヒトのアルツハイマー病の脳にみられる老人斑の沈着するタンパク質の1つであり,アミロイドβタンパク前駆体(BPP)遺伝子の分解産物である.本研究ではカニクルザルのBPP遺伝子領域の変異性を解析し,カニクイザルにおける新たな遺伝標識の確立をめざし,さらに遺伝子変異と老人斑形成の傾向との関連についてを考察している.実験では,PCRにより部分増幅されたいくつかのBPP遺伝子の断片における変異の検出を試みた.対象はマレーシア,インドネシア,フィリピンの3地域より由来する集団の試料と,家系に老人斑の形成のみられた3頭である.ヒトで報告されているBPPのイントロン1のSTR多型は,調べたカニクイザルには検出されなかった.次いでBPを形成するエクソン16とエクソン17,およびそれぞれの近傍を形成する断片について,制限酵素の切断点に関する変異の有無を調べた.その結果,エクソン16とその近傍を増幅した断片にEcoRIの部位に関する多型(RFLPs)がおそらく2ヵ所にみられた.この変異はカニクニザルのどの集団にもみられたほか,老人斑形成のみられた家系にもみられた.この変異はイントロン部分にあり,老人斑形成とは直接の関連はないと考えられるが,BPを形成する部分に近い変異であり,さらに他の部位における変異も解析して,老人斑形成の傾向の遺伝的指標となりうるかについて検討したい.また,アミロイド沈着のメカニズムを探るために,カニクイザル1次培養ニューロンにおける遺伝子導入によるBPの発現実験を企画しているが,このためのカニクイザルBPP遺伝子のエクソン16と17部分が連結したcDNA部分をPCRにより調整した.このDNA断片には,タンパク合成開始と停止のシグナルを含んでいる.

A breakdown product of the beta protein precursor (BPP). In this study, we analyzed the differences in BPP genetic domain, established new genetic markers, and investigated the differences in genetic domain and the tendency of age spot formation. In fact,PCR amplification was partially increased, and fragments of BPP fragments were detected. For example, the three regions of the population have different origins, and the family has different ages. The STR polymorphism of BPP's INTRON1 is reported in the report, and the tone of the phone is detected. The next step is to adjust the presence or absence of a change in the enzyme's cut-off point. As a result, RFLPs were found to be closely related to EcoRI. This is the first time in a long time that I've seen you. The differences in some parts of age spots are directly related to the formation of age spots. The differences in some parts of BP formation are analyzed. The indicators of age spots formation tendency are discussed. The gene expression of BP was planned for the first time in culture, and the gene expression of BPP was adjusted by PCR. The DNA fragment is in the middle of the synthesis process.