权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

江戸時代人の歯からのDNA抽出と解析の試み

尝试从江户时代人的牙齿中提取DNA并进行分析

基本信息

批准号：
11874127
负责人：
針原伸二
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11874127/
关键词：
江戸時代人歯 DNA抽出ミトコンドリアDNA PCR Y染色体 X染色体現代人性別判定

项目摘要

前年度は,主に現代人の歯を用いて,歯からDNAが抽出できるのか,また抽出したDNAからどのような遺伝子の解析が可能なのかについて,技術的に検討した.今年度は実際に江戸時代人骨の歯の試料を用いて,DNAの抽出と解析を試みた.青森県八戸市新井田遺跡から発掘された人骨から,異なる個体のものと判断できる36本の歯の試料を得た.前年度に,現代人の試料で試みた方法と同様に,それぞれの歯根部を切断して,破砕し,EDTA溶液中にてしばらく脱灰した後,プロテイナーゼ処理して,フェノール法にてDNAを抽出した.土中にて長時間を経た試料からの抽出であることもあり,DNAを定量分析したり,電気泳動での確認は不可能であったが,ミトコンドリアDNA(mtDNA)のPCR増幅は,36個体中30個体で可能であった.増幅したのは,mtDNAの中で長さの変異のみられる,領域V(non coding region V)を含む120塩基の部分である.2回の増幅により,予想される長さの断片を得ることが確認された.長さの変異は,9塩基対の欠失として報告されているが,今回増幅が認められた30個体中,3個体で増幅された断片が短く,欠失の変異があると考えられた.性別判定は,Y染色体特異的反復配列の部分をPCRで2回増幅し,断片の有無を確認した.36個体中,断片が検出されたのは10個体であった.X染色体中に1箇所しかない配列の増幅による,X染色体の検出は未だに成功していない.細胞中,多くのコピー数のあるmtDNAや,反復回数の多いY染色体特異的配列ではPCR増幅が可能であったが,ゲノム中に1箇所しかないDNA部分の増幅については,さらに技術的な改良が必要と思われる.

In the previous year, the master DNA drew out the information of the DNA and the technology in the previous year. In this year's world, the human bone material is used in the world, and the DNA has drawn out the analytical data. In the new mine field of Aomori City, the new mine field has been excavated and the human bones have been excavated, and the human bones have been found in 36 books. In the previous year, the method was the same as that in the previous year, and the root was cut off and broken. After the ash was removed from the EDTA solution, it was removed by DNA. After a long period of time, the samples were extracted from the soil, and the samples were quantitatively analyzed by DNA. The electrophoretic assay confirmed that it was not possible to test the temperature, and the DNA (mtDNA) was sensitive to PCR. 30 of the 36 bodies were likely to be affected. The length of the mtDNA is very high, and the domain V (non coding region V) contains a part of it. 2. If you want to change the length of the fragment, you can make sure that you want to make sure that you want to. For a long time, the report has been reported for a long time. This time, of the 30 bodies, 3 are short, and the missing parts are short. In order to determine the sex, the reverse alignment of the Y chromosome characteristic showed that there were two frames in the PCR, and the fragments were confirmed in 36 bodies. In the 36 bodies, 10 were found in the X chromosome. In the X chromosome, the data in the X chromosome were arranged in the frame size, and the X chromosome was not successfully detected. In the cell, the number of mtDNA is much higher than that of Y chromosome, and the width of PCR may be different from that of Y chromosome. In this case, it is necessary to think about the improvement of the technology.