コムギ配偶子致死遺伝子の染色体切断機構の解明:切断点のDNA配列の解析

阐明小麦配子致死基因的染色体断裂机制：断点DNA序列分析

• 批准号: 07740586
• 负责人: 辻本 壽
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740586/
• 关键词: コムギ; Triticum aestivum; 配偶子致死遺伝子; 染色体切断; テロメア-; rDNA; 仁形成体; DNA配列

1.コムギ近縁種Aegilops cylindricaの配偶子致死遺伝子の作用によってコムギの1B染色体に欠失またはその他の異常をホモ接合にもつ個体を多数作った。2.この中には、短腕の仁形成体を切断点とする異常染色体が4系統で認められた。3.これらの系統および、Endo and Gillが作成した4系統よりDNAを抽出した。これを鋳型とし、テロメア-およびrDNA配列のプラーマ-を用いて、PCRを行った。その結果、特定染色体+特定のプライマーの組み合わせで、DNA断片の増幅が見られた。4.増幅断片をプラスミドベクターでクローニングした。複数のクローンを選び、DNA配列を決めた。5.切断点は、17SrRNA遺伝子内に起こっており、9bpの不明の塩基を挟んで30bpの逆位反復配列が存在した。テロメア-配列は、逆位配列内のTAGを認識して付加されていた。この逆位は、配偶子致死遺伝子で切断が起こった後に、姉妹染色分体間の融合と二動原体染色体の切断が起こったことを示していた。6.テロメア-配列は、基本的にはシロイヌナズナと同様なものであったが、独自の変異配列も見られた。7.他の系統においても同様な方法で切断点を解析して、配偶子致死遺伝子による染色体切断機構、および、テロメレースの性質について遺伝的に解明している。

1。由于小麦相关物种Aegilops Cylindrica的配子致死基因的作用，许多人在小麦染色体1b中纯合或其他异常纯合子。 2。在这些线中发现了四个异常染色体，短臂肾脏形成为切割点。 3。从这些菌株中提取DNA以及由Endo和Gill产生的四个菌株。这被用作模板，并使用端粒和rDNA序列等离子体进行了PCR。结果，通过特定染色体和特定引物的组合观察到DNA片段扩增。 4。用质粒载体克隆放大的片段。选择多个克隆，并确定DNA序列。 5。断点发生在17sRRNA基因内，倒重复为30bp，底部未知基础为9bp。添加端粒序列以识别反序列中的标签。这种反转表明，在配子致命基因的裂解后，姐妹染色质被和两分化染色体裂解之间的融合发生。 6。端粒序列与拟南芥基本相同，但也发现了其自身的突变序列。 7。在其他菌株中，以类似的方式分析了断点，以遗传阐明配子致死基因的染色体切割机理和端粒酶的性质。