トランスポゾンタギングによるシロイヌナズナのアントシアニン関連遺伝子の単離

通过转座子标记分离拟南芥花青素相关基因

• 批准号: 07740614
• 负责人: 久保 浩義
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740614/
• 关键词: アントシアニン; シロイヌナズナ; トランスポゾンタギング; ホメオドメイン

トランスポゾンタギング法は突然変異体から変異を起こした遺伝子を単離するのに非常に効果的な方法であり、トウモロコシやキンギョソウにおいてトランスポゾンタギング法を用いて多くのアントシアニン生合成系の構造遺伝子および調節遺伝子が単離されている。本研究では、トウモロコシのトランスポゾンEn-Iを導入したシロイヌナズナから見つかったアントシアニンがふ入り状になる突然変異体(an12)を用い、この挿入変異体からアントシアニン合成に関与する遺伝子の単離を行った。サザンハイブリダイゼーションの結果から約4.5kbpのHindIII断片に目的の遺伝子があることを確かめ、さらにIPCR法により挿入されたI-エレメントに隣接する遺伝子の一部を増幅し、それをプローブに用いcDNAライブラリーおよびゲノミックライブラリーをスクリーニングした。スクリーニングの結果、一種類のクローンをcDNAライブラリーから、また互いにオーバーラップする二種類のクローンをゲノミックライブラリーから得た。これらの塩基配列を調べたところ、ANL2遺伝子は一部まだ不明の部分が残っているが約10個のエクソンからなる事が明らかとなった。また、転写産物は約3kbpの大きさで、その塩基配列をデータベースで検索したところ、シロイヌナズナの表皮の毛の形成に関与しているGL2遺伝子とホモロジーがあることが明らかとなった。GL2遺伝子はホメオドメインをもった調節遺伝子であることが指摘されており、このANL2にも良く似たホメオドメインが存在することから、ANL2もアントシアニン合成に関係した調節遺伝子であることが強く示唆される。

All of a sudden, you know, I don't know, I don't know what to do. In this study, we did not know what to do with En-I. In this study, we did not know what to do. In this study, we did not know what to do in this study. in this study, we did not know what to do in this study. in this study, we did not know what to do in this study. in this study, we did not know what to do in this study. in this study, we did not know how to use the body (an12) in this study. The results showed that the 4.5kbp HindIII fragments were used in order to make sure that the IPCR method was used to make sure that I-e-mail was connected to a frame, and that the cDNA fragment was used. The results, the results and the results. There are about 10 public health care centers in China, such as the public health care center, the ANL2 health care provider, the unidentified partial disabled health care provider, and the public health care provider. 3kbp, write, write, write and write. GL2