原生生物クラミドモナスの光に対する反応を担うタンパクの突然変異体の作成と同定

原生衣藻中负责光响应的蛋白质突变体的创建和鉴定

基本信息

批准号：
07740643
负责人：
吉村建二郎
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740643/
关键词：
クラモドモナス光受容突然変異体 phototaxis gene tagging

项目摘要

原生生物の一種であるクラミドモナスの光受容機構はフォトン1個を感受できるほど高感度であることが知られている。本研究では、gene taggingによる突然変異体を作ることによって光受容に関与する蛋白を明らかにすることを目的としている。Gene taggingにより得られた突然変異体をsingle colonyより増やし、photophobic responseの有無により突然変異体をスクリーニングした。およそ2000コロニーに一つの割合で光に反応しない突然変異体が得られた。現在のところ6系統の光に反応しない突然変異体を得ている。光受容電流を測定したところ、その大きさ、時間経過には差があるもののすべての突然変異体で光受容電流が流れた。光受容電流がない突然変異体を得るべく、さらにスクリーニングを進めている。今回得られた突然変異体のうち2系統については光受容電流に引き続いて起こるfiagellar currentを欠いていた。面白いことに、これらはphotophobic responseは示さないもののphototaxisを示した。このことはphototaxisとphotophobic responseが違う情報伝達系を用いていることを示し、この突然変異体はphotophobic responseに特異的に使われるカルシウムチャンネルの突然変異体であることを示唆している。これらはゲノム中にtagが入っているので遺伝子レベルでの解析が可能であり、現在進行中である。

众所周知，一种原生物学家的光感受器机制足以对一个光子敏感。这项研究旨在通过通过基因标记创建突变体来阐明参与光感受的蛋白质。通过单个菌落增加了通过基因标记获得的突变体，并筛选突变体以进行任何一种局限反应。在大约2000个菌落中以一个速率获得了一个轻度反应性突变体。目前，已经获得了六个光反应性突变体。当测量光感受器电流时，尽管大小和时间过程存在差异，但光感受器电流在所有突变体中流动。正在进行进一步的筛选以获得没有光感受器电流的突变体。在这项研究中获得的两个突变体缺乏纤毛电流，这是在光感受器电流之后发生的。有趣的是，这些表现出照照，尽管不是辐射反应。这表明照光和恐惧症反应使用不同的信号系统，这表明该突变体是专门用于恐惧症反应的钙通道的突变体。这些包含基因组中的标签，允许在遗传水平上进行分析，并且目前正在进行中。