枯草菌のカタボライト抑制の分子機作の解明

阐明枯草芽孢杆菌分解代谢物抑制的分子机制

• 批准号: 07760105
• 负责人: 三輪 泰彦
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Fukuyama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760105/
• 关键词: 枯草菌; カタボライト抑制

枯草菌はグラム陽性菌の中で最も研究が盛んな原核生物であるが、この菌のカタボライト抑制は分解系の酵素誘導や細胞分化のモデルである胞子形成の制御に重要な役割を演じている。このカタボライト抑制の制御系は大腸菌で明らかにされたcAMPの関与する正の制御系では説明できない未知の制御系であると考えられている。枯草菌の分解系オペロンの中で最も研究の進んだグルコン酸オペロンのカタボライト抑制の制御機構を分子レベルで解析することによりその制御機構の解明を目指す。1.グルコン酸オペロンのカタボライト抑制に関与するcis配列の解析 グルコン酸オペロンのカタボライト抑制に関与するcis配列はプロモーターの近傍と下流の2箇所に存在する。そこでプロモーターの近傍と下流のcis配列による抑制系がそれぞれ独立に作動していることを照明するために近傍と下流に存在するcis配列内で共通配列から特に保存されていると思われる塩基に変異を導入し、カタボライト抑制の影響を解析した。その結果、プロモーターの近傍と下流のcis配列による抑制系がそれぞれ独立に作動していることが明らかになった。2.グルコン酸オペロンのカタボライト抑制の転写調節機構の解析 申請者はカタボライト抑制下でプロモーターの下流にあるcis配列を含む領域で転写量の減少を観察している。このことから下流にあるcis配列によるカタボライト抑制の制御系が転写伸長を妨害する機構(転写のロードブロック機構)であると考え、この仮説を立証するためにノーザンブロット方によりカタボライト抑制下で(in vivo)転写伸長がブロックされた転写産物の同定を試みた。その結果、プロモーターの下流にあるcis配列付近で転写伸長が妨害された転写産物を同定することができた。しかし、この転写伸長妨害をin vitroで再現するに至らなかった。

In the bacterium of positive of hay bacteria は グ ラ ム の で も most research が sheng ん な prokaryotes で あ る が, こ の bacteria の カ タ ボ ラ イ ト inhibit は decomposition is の enzyme induction や cell differentiation の モ デ ル で あ る spore formed の suppression に cut を play important な service じ て い る. こ の カ タ ボ ラ イ ト inhibit の suppression system は coliform で Ming ら か に さ れ た cAMP の masato and す る is の suppression system で は illustrate で き な い unknown の suppression system で あ る と exam え ら れ て い る. Hay bacteria decomposition is の オ ペ ロ ン の の で も most research into ん だ グ ル コ ン acid オ ペ ロ ン の カ タ ボ ラ イ ト inhibit の system royal institution を molecular レ ベ ル で parsing す る こ と に よ り そ の system royal institution の interpret を refers す. 1. グ ル コ ン acid オ ペ ロ ン の カ タ ボ ラ イ ト inhibit に masato and す る cis with column の parsing グ ル コ ン acid オ ペ ロ ン の カ タ ボ ラ イ ト inhibit に masato and す る cis with column は プ ロ モ ー タ ー の nearly alongside と obscene の 2 are に exist す る. そ こ で プ ロ モ ー タ ー の nearly alongside と obscene の cis with column に よ る inhibition is が そ れ ぞ れ independent に actuation し て い る こ と を lighting す る た め に nearly exist alongside と obscene に す る cis with common で within the column column か ら, に save さ れ て い る と think わ れ る salt base に - different を import し, カ タ ボ ラ イ ト の influence を し analytical た. そ の results, プ ロ モ ー タ ー の nearly alongside と obscene の cis with column に よ る inhibition is が そ れ ぞ れ independent に actuation し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. 2. グ ル コ ン acid オ ペ ロ ン の カ タ ボ ラ イ ト inhibit の planning write regulator の parsing applicants は カ タ ボ ラ イ ト curb で プ ロ モ ー タ ー の obscene に あ る cis with column を で containing む field planning write を の it can reduce the 観 examine し て い る. こ の こ と か ら obscene に あ る cis with column に よ る カ タ ボ ラ イ ト inhibit の suppression system が planning write elongation を sabotage す る institutions (planning write の ロ ー ド ブ ロ ッ ク) で あ る と え test, こ の 仮 said を testification す る た め に ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト party に よ り カ タ ボ ラ イ ト inhibit で (in vivo)転 write the extension がブロッ された転 された転 write the product same as を try みた. そ の results, プ ロ モ ー タ ー の obscene に あ る cis go pay nearly で planning write elongation が sabotage さ れ た product planning write を be す る こ と が で き た. <s:1>, 転 転 write extension hindrances をin vitroで reappearance するに to らな った った った.

项目成果

Yasutaro Fujita: "Specific recognition of the Bacillus subtilis gnt cis-acting catabolite responsive element by a protein complex formed between CcpA and Seryl-phosphorylated HPr" Molecular Microbiology. 17. 953-960 (1995)

Yasutaro Fujita：“CcpA 和丝氨酰磷酸化 HPr 之间形成的蛋白质复合物对枯草芽孢杆菌 gnt 顺式作用分解代谢物响应元件的特异性识别”分子微生物学。