蛍光色素多回ラベリング法による貝類硬組織形成過程の解析

荧光染料多重标记法分析贝类硬组织形成过程

• 批准号: 07760190
• 负责人: 大越 健嗣
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Ishinomaki Senshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760190/
• 关键词: 蛍光色素; 標識; 貝殻形成; テトラサイクリン; アリザリン・コンプレクソン; 成長; マガキ; 水産

これまで貝類の成長過程の解析には貝殻にみられる成長線(成長縞)といわれる構造が用いられていたが,成長線形成は生理的要因や生息環境要因に左右されやすく,形成要因の特定や正確な成長の計測が困難であった。そこで本研究では,まずこれまでヒトを含め,ホ乳類の歯や魚類の耳石などの標識剤として有効性が確認されている蛍光色素が貝類硬組織形成過程解析のマーカーとして有効かどうかを検討し,さらに有効と認められた標識剤を用いて1回もしくは多回ラベリングを行い形成過程の解析,複数の硬組織の形成過程の関連性の解析を試み知見を得た。材料と方法:材料-マガキ貝殻,ヒレジャコガイ・ヒメジャコガイ貝殻,腎臓顆粒,ヒザラガイ貝殻,鱗片,歯舌,顆粒などの硬組織。標識剤の検討-テトラサイクリン(TC),アリザリン・コンプレクソン(ALC)について,濃度,処理時間,生残・成長阻害などの影響を検討した。蛍光色素処理後一定期間飼育し,採集・解剖し各硬組織を樹脂に埋め,ダイヤモンドカッターで薄片化し,表面研磨の後,蛍光顕微鏡で観察した。結果:殻長2-3mmの稚貝では設定したALC濃度に係わらず,処理時間が長くなると死亡個体が増加するという例があったが,他の貝類では両色素とも生残にとくに影響はなかった。貝殻や鱗片への標識はTCの方が観察しやすく,顆粒は自家蛍光があり標識の有無の確認は困難であった。マガキ貝殻ではTC-ALCの多回染色も可能であった。

Analysis of the growth process of shellfish The physiological factors that form the long-term are the control factors of the living environment, the factors that form the factors are specific, and the growth and measurement are difficult and difficult.そこでThis study is made of では,まずこれまでヒトをcontaining め,ホmilk type の歯やfish のotolith などのidentification剤として Effectiveness が Confirmation されている荍Photopigment が Analysis of the formation process of shellfish hard tissue のマーカーとして Effectiveかどうかを検问し, さらに Effective とcognize められたLOGO 剤を Use いて 1 return もしくは many times ラベリンThe analysis of the formation process of グを行い, the analysis of the connection of the formation process of plural hard tissue, the test of knowledge and the realization of knowledge. Materials and methods: Materials - マガキ shells, ヒレジャコガイ・ヒメジャコガイ shells, kidney granules, ヒザラガイ shells, scales, tongue, granules and hard tissue. Logo: テトラサイクリン(TC),アリザリン・コンプレクソン( ALC), concentration, processing time, survival and growth inhibitory effects. After treatment with the pigment, they were raised for a certain period of time, and each hard tissue was collected and dissected, buried in resin, and thinned into thin slices. After surface grinding, the tissue was examined with a microscope. Result: The spat with a shell length of 2-3mm died due to the setting of the ALC concentration and the long processing time. Individual が increase するという examples があったが, his のshellfish では両pigment とも生 residual にとくに affects はなかった. It is difficult to confirm the presence or absence of the self-made logo of the shell and scales. The multi-pass dyeing of TC-ALC is possible with the mako shell.