PCR増幅パターンに変化のある牛ウイルス性下痢粘膜病ウイルスの遺伝子解析

PCR扩增模式变化的牛病毒性腹泻粘膜病病毒遗传分析

• 批准号: 07760307
• 负责人: 田島 誉士
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760307/
• 关键词: 牛ウイルス性下痢粘膜病; BVD-MD; PCR; 変異遺伝子

近年、牛ウイルス性下痢粘膜病(BVD-MD)ウイルスのgp25をコードする遺伝子が正常より約300bp大きく、gp48をコードする遺伝子が正常より約300bp小さいウイルス遺伝子が、PCR検査により野外発症牛から検出された。このPCR増幅パターンに変化のあったBVD-MDウイルス(変異ウイルス)も、既報のウイルス株と同様の発症機序を有していることが接種試験において確認されたことを平成6年度本研究(課題番号06760287)において示した。そこで今回、この変異ウイルスの遺伝子変異様式を追究するために種々検討した。まず、変異ウイルスおよびBVD-MDウイルスの標準株であるNADL株のPCR増幅遺伝子を制限酵素BspEIで処理した。この酵素の認識部位はgp48遺伝子中に1ヵ所存在するので、NADL株のgp48PCR増幅遺伝子は2本に切断された。しかし、変異ウイルスのgp25およびgp48領域のPCR増幅遺伝子はどちらもBspEIにより消化されなかった。また、NADL株のそれぞれのPCR増幅遺伝子内の任意の25〜30塩基を認識するプローブを用いサザンブロット解析を行ったところ、変異ウイルスのPCR増幅遺伝子はどちらもこれらのプローブと反応しなかった。したがって変異ウイルスのPCR増幅パターンの変化は、gp25およびgp48遺伝子相互の置換ではない可能性が示唆された。次に、本研究で使用しているPCR用プライマーについて他のウイルス株に関する報告およびコンピューター解析に基づき検討したところ、gp48遺伝子を増幅するプライマーはp20およびp14領域を認識していることが判明した。p14遺伝子はウイルス遺伝子内で再配列を生じやすい遺伝子であるとの報告がある。したがって本研究で対象とした変異ウイルスでも再配列が生じ、そのためまったく別の領域が増幅されている可能性も考えられた。現在この変異遺伝子のシークエンス解析を実施中であり、まもなくその本態が明らかになる。

In recent years, bovine dysentery mucosal disease (BVD-MD), bovine dysentery mucosal disease (300bp), bovine dysentery mucosal disease (PCR), bovine dysentery, dysentery, bovine dysentery, dysentery, bovine dysentery, bovine dysentery, dysentery, bovine dysentery, dysentery, bovine dysentery, In the case of PCR, there is a positive correlation between the clinical data of BVD-MD and the disease mechanism of the same disease. This study (no. 06760287) has been demonstrated in this study in 2006. This time, we will conduct a series of investigations in the form of an investigation in the form of a trial. The restriction enzyme BspEI was prepared by using the standard plant, the NADL plant, the PCR, the restriction enzyme, the enzyme, and the enzyme. The enzyme is known to exist in the gp48 seed, and the gp48PCR of the NADL plant is cut off in two copies. Please tell me how to digest the data from the gp48 field, the PCR, the PCR, the BspEI, the digestion, the price, the price, the price. In the case of NADL and NADL, there is no need to know that any one of them is 25-30-year-old. In this case, you can use the data to parse the data in the row. You need to know that you are not in a position to do so, and that you need to know that you are not in the market. I don't know what to do. I don't know. PCR, I don't know. I don't know. For the second time, in this study, we used the PCR software to determine the accuracy of the report, the data analysis, the data analysis, the p20 data acquisition, the p14 domain knowledge analysis and the gp48 analysis. The p14 child