細胞傷害性マクロファージに発現されるMHCクラスI分子受容体cDNAのクローニング

细胞毒性巨噬细胞中表达的 MHC I 类分子受体 cDNA 的克隆

• 批准号: 07770095
• 负责人: VERKHUSHA V.
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770095/
• 关键词: マクロファージ; MHCクラス分子; 発現クローニング; cDNA; 移植片拒絶反応

ある種のマクロファージ(Mφ)が、自己の異常細胞やがん細胞を特異的に認識し傷害することが次第に明らかにされ、特異的免疫機構においても、リンパ球と同様にその重要性が指摘され始めている。本研究では、移植片拒絶反応において常に大量に浸潤するallograft-induced Mφ(AIM)の非自己MHCクラスI分子受容体の存在を検討した。精製した非自己可溶性MHCクラスI分子を細胞非特異的付着の少ないバクテリア用の35mm培養皿(Falcon)にコートし、AIMの非自己可溶性MHCクラスI分子認識能を検討した。即ち、10^6のAIMを加えて室温で2h放置した後、結合していないAIMを洗浄除去し残存する細胞をカウントしたところ、rsH-2K^dをコートした培養皿に約3%のAIMが結合した。しかし、非自己rsH-2D^dや自己nsH-2K^bをコートした培養皿への結合は殆ど見られなかった。次にこのrsH-2K^dへのAIMの結合が、移植片拒絶反応の際に浸潤してくるAIMに特異的な性質であるかどうかを検討した。その結果、バクテリアの一種であるBCGで誘導したMφも同様にMHCクラスI分子rsH-2K^dを認識することが判明した。しかし、カゼインやチオグリコレートで誘導した炎症性のMφにはそのような性質が認められなかった。MHCクラスI分子を認識するMφ上の実体を明らかにする為にAIMのmRNAから作成したcDNAライブラリーを、高発現ベクターに組み込んでCOS細胞に導入して発現させ、その中から受容体を発現している細胞を、rsH-2K^dをコートした培養皿を用いたpanning法により濃縮し、目的とするcDNAをクローニングを試みている。

あるkind of のマクロファージ(Mφ)が、My own abnormal cells やがん cells をSpecial にKnowing しhurt することが时No. に明らかにされ, specific immune mechanism においても, リンパball と同様にその Importance されstart めている. In this study, the rejection of graft rejection was due to the presence of a large amount of allograft-induced Mφ (AIM) and non-self MHC I molecule receptors. Purified non-self-soluble MHC クラスI molecule and non-specific attachment of cells for use in 35mm culture medium Falcon (Falcon) and AIM are non-self-soluble MHC molecules. That is, add 10^6 AIM to room temperature and leave it for 2 hours, then combine it with AIM and wash it to remove any remaining residue.るCell をカウントしたところ, rsH-2K^d をコートした Petri dish に About 3% のAIM が binding した.しかし, non-own rsH-2D^dやown nsH-2K^bをコートした Petri dish へのcombination は殆ど见られなかった. The combination of H-2K^d and AIM, the graft rejection and the infiltration of the graft are the specific properties of AIM.そのRESULTS, バクテリアの一kind of であるBCG でinduced したMφも Same as 様にMHC クラスI molecule rsH-2K^dをKnown することが clarified した.しかし、カゼインやチオグリコレートでinducing したinflammatory のMφにはそのような性がcognize められなかった. MHC クラスI molecular recognition するMφ上の実体を明らかにする为にAIMのmRNAから成したcDNAライブラリーを、高発现ベクターに集团み込んでCOS cell にINTRODUCE し発成させ、その中からReceiverを発appearsしているcellを、rsH-2K^dをコートした Petri dishをUse the panning method to concentrate and use the purpose of the cDNA とするcDNA test.