高速液体クロマトグラフィー質量分析計による体組織試料の分析とデータベースの作製

使用高效液相色谱质谱仪分析身体组织样本并创建数据库

• 批准号: 07770328
• 负责人: 稗田 洋子
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770328/
• 关键词: LC; MS; キャピラリーカラム; 固相抽出; 血液; 尿; 毛髪; スクリーニング

高速液体クロマトグラフィー(HPLC)・質量分析計(MS)(LC/MS)を用い、ヒト体組織試料中の薬毒物スクリーニング分析法を確立する目的で研究を行った。MSのイオン化はfast atom bombardment(FAB)法、インターフェースはキャピラリーチューブ(55μm,i.d.)とfritを用いた。LCはカラムスイッチングシステム・Develosil C_<18>(0.3mm,i.d.)キャピラリーカラム(濃縮・分離)を用い、ミクロ流量用に改造したシステムで行った。移動相は水・メタノール系に酢酸を加えた系をベースとし、分離は高極性から低極性物質まで検出できるようにメタノール濃度勾配グラディエントにより行った。試料の前処理は、毛髪はアルカリにより溶解させた後、その他の試料は過塩素酸により除蛋白した後(尿を除く)、Extrelutを用いて固相抽出を行った。内部標準物質(IS)として7-エチルテオフィリンを用いた。多くの薬毒物はこのグラディエント溶離により、分離・検出された。検出されたピークはISの保持時間(RT)と対比することによる相対保持時間(RRT)を求めた。化合物Xの相対保持時間RRT(X)=RT(X)/RT(IS)×1000で求めた。LC/FAB-MSにはデータベースがなく、マススペクトルが得られてもGC/MSのような検索が出来ない。今回はRRTとマススペクトルを検索ファイルに登録し、それらから検索できるように入力した。今回は血液・尿・毛髪について、ほぼいつも検出される物質、および向精神薬や睡眠薬等50の物質について登録を行った。入力データをさらに増やすことにより、今まで不可能とされてきたLC/MSによる薬毒物スクリーニング分析が実現できると考えられる。しかし、数千数万とある化合物を考えると、個人レベルでの入力には限界があり、商業レベルでのLC/FAB-MSにおけるマススペクトルパターンによる検索データベースの供給が強く求められることも再認識された。

High speed liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry (LC/MS) were used to establish a method for the analysis of toxicants in body tissue samples. MS fast atom bombardment(FAB) method, MS fast atom bombardment(55μm,i.d.) Frit is used. LCはカラムスイッチングシステム·Develosil C_<18>(0.3mm,i.d.) The flow rate is changed from concentration to separation. The mobile phase is composed of water, acid and other substances, and the separation of high polarity and low polarity substances is carried out in a concentrated manner. Sample pretreatment, hair removal, dissolution, and other sample removal of protein (urine removal), Extreut, solid phase extraction Internal reference material (IS) 7- Many toxic substances are dissolved, separated and extracted. Find the retention time (RT) and the retention time (RRT). RRT(X)=RT(X)/RT(IS)×1000. LC/FAB-MS is the best choice for GC/MS This is the first time I've ever seen a woman. Today, 50 substances such as blood, urine, hair, etc. are registered. In addition, it is not possible to analyze the toxicity of LC/MS in the future. In addition, thousands of chemical compounds have been tested, personal information has been collected, and commercial information has been collected from LC/FAB-MS.