アシアログライコプロテインのエンドサイトーシスならびに細胞内トランスポート

脱唾液酸糖蛋白的内吞作用和细胞内转运

基本信息

批准号：
07770408
负责人：
原田大
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770408/
关键词：
アシアロ糖蛋白細胞骨格ライソゾーム肝細胞

项目摘要

肝細胞でのアシアログライコプロテイン(ASGP)のレセプターを介した取り込みと細胞内輸送機構を初代培養肝細胞を用い行った。ASGPの動態はASGPに金コロイドを結合させ、その動態を電子顕微鏡にて観察した。レセプターを介さない取り込みは西洋ワサビペルオキシラーゼ(HRP)を用いて行った。細胞内の種々の因子の役割を検討するため微小管の阻害剤であるコルヒチン、微細線維の阻害剤であるサイトカラシンB、エンドゾームやライソゾーム内の低いpHを上昇させるためにクロロキン、バフィロマイシンA1の影響を検討した。コルヒチンはASGPの取り込みを阻害し細胞内輸送をも阻害したが、HRPの細胞内輸送は阻害しなかった。サイトカラシンBはASGPとHRPの取り込み、細胞内輸送ともに影響を与えなかった。クロロキンとバフィロマイシンA1はASGPの取り込みを阻害したが、HRPの取り込みは阻害しなかった。以上より微小管はASGPの取り込み、細胞内輸送に重要な役割を演じていると考えられ、微小管が阻害されるアルコール性肝障害ではこの機構が影響を受けると考えられる。微細線維はこの機構への関与は少なく微細線維が障害される胆汁うっ滞の状態ではこの機構はあまり影響を受けないと考えられた。エンドゾームやライソゾーム内の低いpHもASGPの取り込みには重要であったことより、このpH勾配が障害されるような病態でもこの機構に障害がおよぶと考えられた。

使用原发性培养的肝细胞进行了肝细胞中亚乳糖蛋白（ASGP）的受体介导的摄取和细胞内转运机制。 ASGP的动力学与ASGP与胶体金结合，并且在电子显微镜下观察到了动力学。使用辣根过氧化物酶（HRP）进行受体介导的摄取。为了研究细胞中各种因素的作用，秋水仙碱，微管抑制剂，细节B，微生物抑制剂，氯喹和巴菲霉素A1的作用增加了内体和溶酶体内的低pH值。秋水仙碱抑制了ASGP的摄取，也抑制了细胞内转运，但没有抑制HRP的细胞内转运。细胞切拉斯蛋白B对ASGP和HRP摄取或细胞内转运没有影响。氯喹和巴菲霉素A1抑制了ASGP的摄取，但不能抑制HRP摄取。从上面可以看出，微管在ASGP摄取和细胞内转运中起着重要作用，并且这种机制被认为在抑制微管的酒精肝疾病中受到影响。据认为，细纤维几乎没有参与这种机制，在胆汁淤积的状态下，在这种机制中，细纤维受损，这种机制没有显着影响。内体和溶酶体内的pH值也对ASGP摄取也很重要，人们认为即使是这种pH梯度受损的病理状况也可能导致这种机制受损。