アデノウイルスベクターを用いたVEGFによる遺伝子治療に関する解析

使用腺病毒载体分析 VEGF 基因治疗

• 批准号: 07770494
• 负责人: 中岡 隆志
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770494/
• 关键词: アデノウイルスベクター; balloon imjarg; 遺伝子治療

ラット頚動脈損傷モデルは、PTCA後再狭窄の動物実験モデルとして最もよく解析され、かつ頻用されているもので、左外頚動脈からカテーテル(2F Fogarty emboleetomy catheler)を総頚動脈に挿入し、バルーンを膨満させた状態で数回往復させると総頚動脈の内皮が損傷され、内膜肥厚が生じてくる。当研究者らは、頚動脈損傷後2週間で頚動脈切片の新生内膜・中膜面積比(I/M比)1.0-1.2と再現よく内膜肥厚を起こすシステムを確立した。現在、このモデルを用いてPTCA後再狭窄に対する遺伝子治療の可能性について検討を行っている所である。アデノウイルスベクターを用いた遺伝子治療の試みは多く報告されているが、現在なお充分な発現レベルが得られない等、解決すべき問題は多い。クリップで頚動脈内に閉鎖空間を作り、AdexlCALacZ(非増殖型アデノウイルスにCAGプロモーターとβ-ガラクトシダーゼ(β-gal)の遺伝子を組み込んだもの)を含む液をインキュベートするやり方で、頚動脈でのβ-gal遺伝子発現について検討した。正常血管に遺伝子導入した標本ではX-galの染色は認めなかったが、損傷直後遺伝子導入した標本では、まばらな染色を認めた。発現効率を高める目的でステロイド等の免疫抑制剤を試みたが、発現効率の著明な改善は認めなかった。ところが、損傷後7日目に遺伝子を導入すると、非常に高効率にβ-gal遺伝子を発現させうることを見いだした。現在の所、この高効率発現の機序は明らかでないが、in vivoで導入した遺伝子の発現量の点で、現在までに報告されている多くの結果に比べても優れている。この方法は局所的に充分発現した遺伝子の効果を期待できうるので、現在この方法を用いて実際にラット頚動脈損傷モデルの実験での内膜肥厚に対する効果の検討を行っている。将来的にPTCA後再狭窄に対する遺伝子治療を考えた場合にも応用可能であると期待できる。

In animals with coronary artery injury and restenosis after PTCA, the most frequent analysis, frequent use, left lateral artery occlusion (2F Fogarty embolism catheterization), and multiple cycles of coronary artery occlusion, endothelial injury, and intimal hypertrophy occurred. The neointima/media area ratio (I/M ratio) was 1.0-1.2 and the onset of intimal hypertrophy was established 2 weeks after injury. Now, the use of PTCA in the treatment of restenosis is discussed in the context of possible treatment. There are a lot of reports on how to use the gene therapy, and now there are enough reports to solve the problem. AdexlCALacZ(non-genotypic CAG protein and β-gal protein) is a protein containing protein and a protein containing β-gal protein. Normal vessel DNA introduction and X-gal staining are recognized, while damaged vessel DNA introduction and X-gal staining are recognized. Immunosuppressive agents, such as those with high detection rates, are tested to improve detection rates. 7 days after the injury, the gene was introduced, and the rate of β-gal gene was very high. The high efficiency mechanism of the present invention is better than that of the present invention. This method is used to investigate the effects of the full discovery of the gene and its effects on the intimal hypertrophy of the aorta. The future of PTCA restenosis is expected.