メカノストレスによる灌流心からの一酸化窒素産生とそのリアルタイム検出

机械应力导致灌注心脏产生一氧化氮及其实时检测

• 批准号: 07770535
• 负责人: 一守 康史
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770535/
• 关键词: メカノストレス; 一酸化窒素; ずり応力; EDRF; 灌流心; ミオグロビン

血管内皮細胞と血流との間に発生するずり応力(shear stress)や心筋の収縮拡張に伴って血管に加わるメカノストレスに対する冠血管の局所的血流調節機構における一酸化窒素(NO)の役割を明らかにするため、極微量・過渡的に発生するNOをリアルタイムで検出する方法を検討した。メカノストレスによるNOの生成をリアルタイムで測定し、冠血管からのNO生成量とメカノストレスの強度・種類との関連を検討した。モルモット及びラット摘出心の大動脈に挿管し冠潅流圧と冠血流をモニターしつつ逆行性(Langendorff Mode)に冠血管を定流速潅流(5-30ml/min)した。NO補足剤としてオキシミオグロビン(MbO_2、1μM)を潅流液に加え、それがNOと定量的に反応してメトミオグロビン(MetMb)に変化したものHPLC用吸光検出器で検出した。本装置におけるNO検出感度は10nMであった。10^<-6>Mのブラジキニンを投与しこれによって発生するNOがリアルタイムに検出でき、薬剤投与によるNO変化については評価可能であることがわかった。一方、paired pacingによるpostextrasystilic potentiationによって心筋によるメカノストレス量を変化させる実験ではNO産生量が少ないせいか目立ったNO産生を検出できなかった。フローの変化によって基線のNO生成量は変化したがフローの変化によって生成したNOの希釈率が変化するためNO発生量の評価は困難であった。今後、定量的なメカノストレス付加の方法を考案し、また潅流心の冠血管に定量的にずり応力を与える方法を検討して定量化を急ぎたい。

Methods for detecting the shear stress, contraction and expansion of the cardiac muscle associated with vascular endothelial cells and the regulation of blood flow in coronary arteries are discussed. The relationship between NO production in coronary artery and its intensity and type is discussed. The coronary artery flow rate (5-30ml/min) of coronary artery is constant in Langendorff Mode. NO complement and change to the standard (MbO_2, 1μM) in the liquid phase, and change to the standard (MetMb) in the quantitative phase of NO in the HPLC absorbance detector. The device has a NO detection sensitivity of 10nM. 10^<-6>M The amount of NO produced by a single, paired pacing device varies from one side to the next. It is difficult to evaluate the NO production rate of the base line. In the future, quantitative analysis of coronary artery disease will be carried out.