X染色体不活化の検出による皮膚前癌病変におけるクローナリティに関する研究

X染色体失活检测皮肤癌前病变克隆性研究

• 批准号: 07770657
• 负责人: 宇原 久
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770657/
• 关键词: X染色体不活化; アンドロゲル受容体遺伝子; 皮膚腫瘍; モノクローナリティ

本研究は、1992年 Allenらによって明らかにされたアンドロゲン受容体遺伝子塩基配列をもとに、女性の約90%に保存されているCAG繰り返し配列部分をPCR法によって検出することにより、皮膚腫瘍において良性、境界型、悪性に分類されているものについてそのモノクローナリテイの有無を検出することにより、腫瘍細胞の単一性という面から再評価することを目的とする。本年度はまず、安定した実験方法の確率をめざした.8例の女性メラノーマ患者より得られたホルマリン固定パラフィン包埋組織より腫瘍部分と非腫瘍部分を切り出しDNAを抽出後、サンプルの一部を制限酵素Hhalで処理した。次にアンドロゲン受容体遺伝子のCGA繰り返し配列部分をはさむ形で作成したプライマーを用いて、制限酵素処理後のサンプルと未処理のサンプルについてPCR法で増幅を試みた。 しかし、当初期待していた程度のDNAの増幅が得られなかった。 メラニンによる阻害作用あるいはサンプル内に混入しているポリメラーゼ阻害物質の存在が疑われたためキレートビーズなどによるサンプルの洗浄を行いインターナルコントロールの増幅は可能となったが、アンドロゲン受容体遺伝子の増幅が不良(8例中1例のみ増幅した)のため、さらにプライマー位置を変更し再度増幅を試みている。また増幅された1例のサンプルについてはプライマーの一方のみを標識しPCR法による増幅後ポリアクリルアミドゲル上での泳動を行っている。

In this study, about 90% of Allen's 1992 female patients were identified as having the CAG receptor gene sequence. PCR was used to detect the CAG receptor gene sequence in benign, boundary, and malignant skin lesions. The tumor cells were divided into two groups. This year, the accuracy rate of the method was 1.8%. 8 cases of female patients were treated with Hgal. In addition, the CGA sequence of the receptor gene was modified to make the enzyme treatment and control the enzyme treatment, and the PCR method was used to increase the amplitude. The DNA amplification of the original expected level was achieved. The presence of a hazardous substance is suspected to be mixed into the container, and the amplitude of the substance is increased. The amplitude of the substance is increased. The amplitude of the substance is increased. A sample of the sample was amplified and the sample was identified by PCR.