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虚血性神経細胞死における遺伝子発現の変化

缺血性神经细胞死亡过程中基因表达的变化

基本信息

批准号：
07771083
负责人：
斉藤延人
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771083/
关键词：
脳虚血神経細胞死サイクリン

项目摘要

齧歯類における短時間の脳虚血後の海馬CA1領域の遅発性神経細胞死のモデルでは神経細胞死の組織像は典型的なネクローシスとは異なっており、その細胞死の課程において神経系のprogrammed cell deathと共通の経路をたどる可能性が考えられる。神経系のprogrammed cell deathのモデルでは、cell cycle関連遺伝子であるcyclin D1の発現が増加し、cell cycle関連遺伝子のバランスが変化することが細胞死と関連あるという報告がある。遅発性神経細胞死の際にもこれらのバランスの変化が神経際死に関与しているのかを調べるために、砂ネズミの5分間両側頚動脈閉塞モデルを用いてcell cycle関連遺伝子であるcyclin D1, cyclin D2, cyclin D3,及び、cdk4, cdk5の発現の変化をノーザンブロッティングで解析した。麻酔下に砂ネズミの両側内頚動脈を5分間閉塞、再開通し、一過性脳虚血をモデルを作成した。虚血後、1.5時間、3時間、6時間、12時間、24時間後にネズミをsacrificeし、脳を取り出し海馬を摘出して、mRNAを抽出した。cyclin D1、cyclin D2、cyclin D3、及び、cdk4、cdk5の各プローブは合成ologonucleotide primerを用いてRT-PCRで作成し、DNAシークエンスを読んで確認した。10ug/laneのtotal mRNAを電気泳動し、cell cycle関連遺伝子のprobeを用いてノーザンブロッティングを行った。虚血後24時間後までにはcell cycle関連遺伝子であるcyclin D1、cyclin D2、cyclin D3、及び、cdk4、cdk5のmRNA発現に有意な変化は認められないことがわかった。cell cycle関連遺伝子の発現の変化は頸部交感神経節のprimary cultureを用いた神経系のprogrammed cell deathのモデルに特異的な現象なのかもしれない。それ以外のアポトーシス関連遺伝子の発現の変化が遅発性神経細胞死に関係している可能性があるので、今後さらにそこれらの遺伝子の発現の変化も調べる予定である。

After a short period of time in the field of CA1, the organization of cell death is similar to that of a typical doctor, and the possibility of a common network network in the programmed cell death system is tested. Programmed cell death, cell cycle, cyclin D1, cell cycle, cell cycle, dead cells, dead cells, dead cells. The god of sex, the cell death, the death, the It is necessary to stop and reopen the drug within 5 minutes under the anesthesia, and once the blood deficiency is caused, it will become a drug. After blood deficiency, 1.5 hours, 3 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours later, the sacrifice was collected, the sea fish was extracted from the sea, and the mRNA was extracted. Cyclin D1, cyclin D2, cyclin D3, and ologonucleotide primer, cdk4, cdk5. The synthetic ologonucleotide primer is made of RT-PCR, and the DNA is used to confirm. 10ug/lane total mRNA electrophoretic swimming equipment, cell cycle electrophoretic swimming equipment and probe swimming equipment are used in this program. 24 hours after the deficiency of blood, we detected cyclin D1, cyclin D2, cyclin D3, and cdk4, cdk5 mRNA after 24 hours of blood deficiency. Cell cycle said that the sympathetic god "primary culture" used the word "programmed cell death" to make a special picture of the sympathic god. In the future, the possibility of death may be affected, and in the future, you will know how to make a decision.