アポトーシス抑制タンパク質による虚血脳保護に関する研究

凋亡抑制蛋白对缺血性脑组织的保护作用研究

基本信息

批准号：
11671355
负责人：
斉藤延人
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11671355/
关键词：
脳虚血アポトーシス神経細胞死

项目摘要

神経細胞におけるXIAPの発現を確認し、脳虚血後の神経細胞の生存にXIAPの発現が関与するのかを明らかにし、さらにXIAPの過剰発現により、神経細胞のアポトーシス、及び虚血性神経細胞死が制御できるのかどうかを明らかすることを本研究の目的とした。脳虚血はラットの4血管閉塞モデルで作成し、海馬、大脳皮質におけるXIAPの発現をwestern blottingで解析した。前年度に明らかにした虚血後のXIAP mRNAの発現増加に反し、XIAPの発現は蛋白レベルでは変化がなかった。この結果より、おそらく蛋白合成障害によるXIAP蛋白の合成不全が遅発性神経細胞死の一因となっている可能性が考えられた。次いでラットXIAP c DNAをアデノウィルスベクターにいれ、ラットIAPを大量発現するアデノウィルスを作成し、神経系細胞のアポトーシスを抑制できるかどうかを検討した。NGF存在化に神経細胞に分化したPC12細胞でラットXIAPをアデノウィルスベクターにより大量発現させた。NGF除去によりアポトーシスを誘導すると、コントロールのlacZでは細胞死が起こったが、XIAPを高発現させたPC12細胞ではアポトーシスが抑制された。これらの結果から、XIAPは神経細胞のアポトーシスを防ぐ能力があり、虚血後の神経細胞ではXIAPが必要とされているが、おそらく蛋白合成障害によるXIAP蛋白の合成不全があり神経細胞死がおこる可能性が考えられた。XIAPの機能不全が遅発性神経細胞死の一因となっている可能性が考えられたが、虚血神経細胞保護効果に関してはさらに検討が必要である。

这项研究的目的是确认XIAP在神经元中的表达，以阐明XIAP的表达是否参与脑缺血后的神经元存活，并澄清XIAP的过表达是否可以控制神经元凋亡和缺血性神经元死亡。脑缺血是在大鼠的4个血管闭塞模型中产生的，在海马中的XIAP表达和脑膜皮质通过蛋白质印迹分析。与上一年缺血后XIAP mRNA的表达增加相反，XIAP表达在蛋白质水平上没有改变。该结果表明，由于蛋白质合成疾病引起的XIAP蛋白的合成失败可能导致神经元细胞死亡的延迟。接下来，将大鼠XIAP C DNA放在腺病毒载体中，以创建表达大量大鼠IAP的腺病毒，并研究它是否可以抑制神经系统细胞的凋亡。大鼠XIAP使用PC12细胞中的腺病毒载体大量表达，在NGF存在下已分化为神经元。 NGF去除诱导凋亡导致对照LACZ的细胞死亡，但凋亡被抑制在XIAP表达高的PC12细胞中。这些结果表明，XIAP具有预防神经元凋亡的能力，缺血后的神经元需要XIAP，但是由于蛋白质合成障碍引起的XIAP蛋白的合成可能会导致神经元细胞死亡。据认为，XIAP功能障碍可能导致神经元细胞死亡，但需要进一步研究缺血性神经元保护作用。