病原性酵母カンジダの染色体再配列に関わるRPS1配列とその転写反応

致病性念珠菌染色体重排涉及的RPS1序列及其转录反应

• 批准号: 07857019
• 负责人: 岩口 伸一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nara Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857019/
• 关键词: Candida albicans; 分子生物学; 反復配列; PCR

本研究ではRPS1がRNAを介した組み換えに関与しているかを調べるために、まずC.albicansにおいて発現型RPS1の単離を試みた。発現型のRPS1相同配列は、1006、WO-1株ともに同じ大きさで、約1.3kbであった。発現量はアクチン遺伝子のそれとの比較から、2株とも同程度発現していると考えられる。本研究では新たな試みとして、マグネット・ビーズ上にcDNAライブラリーを構築を行った。これにより安定にライブラリーが保存することができ、さらに、マグネット上のcDNAを鋳型にしてPCR、あるいは、サブトラクションやDNA結合タンパク質などの検索が可能になる。RPS1配列の大きさは、2.1kbなので配列の全てがmRNAとして転写されているわけではない。そこで、RPS1配列のどの部分が発現されているかをPCR法により検討した。マグネット上のcDNAを鋳型として、RPS1由来のプライマーと(dT)_<18>プライマーによりPCRを行った。その結果、プライマー24279、24280、22531、13267とXhoI-(dT)18との組み合わせでPCR産物が得られた。このことは、発現型RPS1は少なくともnon-REP配列とCOM29配列を含むことを示している。REP配列については、その存在はこの実験からは定かではないが、COM29配列がオリジナルのRPS1配列では常にREP配列に接しているのでおそらく発現型RPS1においても存在しているものと推定された。また、COM29由来のプライマーである13267によるPCR産物の大きさは、最も大きいもので約1.2kbのものが認められるので5´末端側にCOM29由来の配列が存在すると予想される。それぞれのPCR産物のクローニングが現在行われている。

This study で は an RPS1 が RNA を interface し み た group in え に masato and し て い る か を adjustable べ る た め に, ま ず c.a. lbicans に お い て 発 type is an RPS1 の 単 from を try み た. The current type <s:1> RPS1 is in the same configuration as に, 1006, and WO-1 strains と と に に is the same as じ large と さで, approximately 1.3kbであった. 発 now quantity は ア ク チ ン heritage 伝 son の そ れ と の is か ら, 2 strains と も 発 now the same extent し て い る と exam え ら れ る. This study で は new た な try み と し て, マ グ ネ ッ ト · ビ ー ズ on に cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を line build を っ た. こ れ に よ り settle に ラ イ ブ ラ リ ー が save す る こ と が で き, さ ら に, マ グ ネ ッ ト on の cDNA を type where に し て PCR, あ る い は, サ ブ ト ラ ク シ ョ ン や dna-binding タ ン パ ク qualitative な ど の 検 cable が may に な る. An RPS1 match column の big き さ は, 2.1 KB な の で match column の full て が mRNA と し て planning write さ れ て い る わ け で は な い. そ こ で, an RPS1 match column の ど の part が 発 now さ れ て い る か を PCR method に よ り beg し 検 た. On マ グ ネ ッ ト の cDNA を type where と し て, an RPS1 origin の プ ラ イ マ ー と (dT) _ < > 18 プ ラ イ マ ー に よ り PCR line を っ た. そ の results, プ ラ イ マ ー 24279, 24280, 22531, 13267 と XhoI - (dT) 18 と の group み close わ せ が で PCR products have ら れ た. <s:1> <s:1> と る, the occurrence type RPS1 <s:1> less なくと non-REP is paired with とCOM29 を containing む とを とを とを shows て て る る る る る る る. REP with column に つ い て は, そ の is は こ の be 験 か ら は set か で は な い が, COM29 match column が オ リ ジ ナ ル の an RPS1 match column で は often に REP with column に meet し て い る の で お そ ら く 発 type is an RPS1 に お い て も exist し て い る も の と presumption さ れ た. ま た, COM29 origin の プ ラ イ マ ー で あ る 13267 に よ の る PCR products with big き さ は, most も き い も の で about 1.2 KB の も の が recognize め ら れ る の で 5 ´ end side に COM29 origin の match column が exist す る と to think さ れ る. Youdaoplaceholder0 the PCR product of <s:1> ロ ロ ニ ニ グが グが グが now われて われて る る.