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病原性酵母カンジダの倍数性変換と染色体再配列を制御する遺伝子の解析

致病性念珠菌倍性转化和染色体重排控制基因分析

基本信息

批准号：
10770117
负责人：
岩口伸一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nara Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770117/
关键词：
Candida albicans 染色体再配列倍数性変換 RAD5 SPS1

项目摘要

日和見感染菌Candida albicansは通常二倍体だが、いくつか菌株では多倍数化した細胞の出現とそれに続く倍数性の減少すなわち倍数性変換が認められ、同時に染色体再編成が生じている。したがって倍数性変換がゲノムの変化を誘導する可能性を示唆している。倍数性変換を示す株の表現型はSps^-(suppresser of ploidy shift)で表される。それに対し、核相が一定である株の表現型はSps^+で表される。細胞融合実験からSps変異は劣性であることが示されているので、Sps^+株のゲノムDNAライブラリーをSps^-株に形質転換し、フロキシンB培地上で白い集落を形成すること、集落形態が滑面となること、増殖速度が速くなること、核の形態が一核となることという選択条件を設定しSPS遺伝子の単離を試みた。前年度に遺伝子破壊株であるSTN21U-1株に形質転換実験を行い、上記の選択方法に基づいてSps^+を示す13個の形質転換体を得た。本年度はその中からNo.115株をSPS遺伝子をもつ候補として選び出した。この株は細胞集団中にSTN21U-1株で観察される細胞よりも小さな細胞を生じる傾向があった。このNo.115株からプラスミドDNAを回収し、インサート部分をサブクローニングし、塩基配列を決定後に相同性検索を行ったところ、RAD5(REV2)遺伝子と高い相同性が見られた。Rad5タンパクはDNA修復タンパクのひとつであり、DNAへリカーゼであると考えられているが、詳しい機能については明らかにされていない。Rad5変異株では組み換えの頻度があがることが報告されているので、Sps^-株で染色体再編成が高頻度に起こるのは、RAD5遺伝子の変異に由来しているかもしれない。また、Sps^-株で高次倍数化するのは、RAD5の未知の機能が損なわれたためかもしれない。以上のことからRAD5がSPS遺伝子群の有力な候補の1つである可能性が考えられた。現在、RAD5遺伝子の機能解析を試みている。

Candida albicans is usually diploid, polyploid. The possibility of multiple changes is shown in the table below. The phenotype of ploidy shift is Sps^-(suppressor of ploidy shift). The phenotype of the plant is opposite to that of Sps^+. Cell fusion is characterized by a variety of different characteristics, such as cell morphology, cell growth rate, cell morphology, and cell differentiation. In the previous year, the mutant STN21U-1 strain was transformed into 13 mutant strains. This year, No. 115 SPS strains were selected as candidates. This strain is called STN21 -1. The No. 115 strain was identified by DNA sequencing, DNA sequencing and DNA sequencing. The RAD5 (REV2) strain was identified by DNA sequencing and DNA sequencing. Rad5: DNA repair, DNA repair, DNA repair. The frequency of chromosome rearrangement in Rad5 variant plants was reported to be high. The function of RAD5 is unknown. The possibility of the above is examined. Now, RAD5 legacy function analysis to try to change the middle.