意識下動物における脳の微細血管の直視下連続的観察法の開発

清醒动物脑微血管连续直接观察方法的建立

• 批准号: 08558086
• 负责人: 堀田 晴美
• 金额: $ 5.95万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08558086/
• 关键词: 脳血管; 脳血流; 頭窓法; 血管径; ラット; デジタルマイクロスコープ; 脳血流の神経性調節

本研究は、細動脈から毛細血管まで大脳皮質や海馬などの脳内の種々の部位の微細血管を連続的かつ定量的に観察する方法を開発することを目的とする。本年度は、意識下動物を用いて、最近開発されたデジタルマイクロスコープを用いて、大脳皮質表面の微細血管を連続的に観察する方法を開発し、種々の生理的刺激を加えた際の、大脳皮質表層血管径の変化を観察し、本方法の生理実験への有効性を明らかにした。1.麻酔下でWistar系ラットの側頭部頭蓋骨に両側性に外径6mmのステンレス製パイプを歯科用セメントで装着した。装着したパイプを用いて脳定位固定装置にラットを固定し、頭蓋骨に4x9mmの穴を開け硬膜を切除し、脳表血管を観察するための窓を開けた。ラットの頭部をパイプで脳定位固定装置に、胴体をサポーターで実験台に安定に固定した。脳の表面の血管にデジタルマイクロスコープの焦点を合わせ、連続的にビデオテープに記録した。ラットの麻酔がさめたのちにデジタルマイクロスコープの倍率1000倍で、直径5-36μmの血管径の変化を連続的に観察することができた。2 脳血管を拡張させることが知られている6%の炭酸ガス吸入刺激1分間を行うと、直径14-27μmの血管の直径はいずれも刺激後30秒で約130-140%に増大した。次に生理的な刺激として、ラットの後肢に1Hzでブラシでこする刺激を2分間加えた。その結果、刺激後1分後に、直径5μmの血管は約130%に、直径15μmの血管は約110%に、直径36μmの血管は約106%に、それぞれ直径が増大した。以上の結果から、デジタルマイクロスコープを用いることにより、意識下動物の脳表面の血管の変化を連続的に観察し、種々の刺激に対する反応を研究することに対応できることが明らかとなった。

The purpose of this study is to develop a quantitative method for detecting microvascular connections in the cortex and hippocampus. This year, we have developed a new method for detecting microvascular connections on the surface of the large cortex. We have developed a new method for detecting the diameter of microvascular connections on the surface of the large cortex when physiological stimuli are added. We have also developed a new method for detecting the physiological characteristics of the method. 1. The lateral cranium of the Wistar system has an outer diameter of 6 mm. Install the positioning fixture, open the 4x9mm hole in the skull, remove the dura, and inspect the blood vessels. The head of the body is fixed in position, and the body is fixed in position. The blood vessels on the surface of the body are divided into two groups: The diameter of the blood vessel is 5-36μm and the magnification of the blood vessel is 1000 times. 2. The diameter of blood vessels with diameters of 14-27μm increased by about 130-140% 30 seconds after inhalation stimulation. The next physiological stimulus is 1 Hz and 2 minutes apart. The results showed that 1 minute after stimulation, the diameter of 5μm blood vessels increased by 130%, the diameter of 15μm blood vessels increased by 110%, the diameter of 36μm blood vessels increased by 106%, and the diameter of 5 μ m blood vessels increased by 100%. The above results show that the blood vessels of the animals are connected to each other.

项目成果

Sakiyama,Y.et al.: "Positron emission tomography reveals changes in grobal and regional cerebral blood flow durng noxious stimulation of normal and inflamed elbow joints in anesthetized cats." Experimental Brain Research. 118. 439-446 (1998)

Sakiyama, Y. 等人：“正电子发射断层扫描揭示了麻醉猫正常和发炎的肘关节受到有害刺激时整体和局部脑血流的变化。”

Hotta,H.et al.: "Cilostazol,a selective cAMP phosphodiexterase inhibitor,dilates retinal arteriols and increases retinal and choroidal blood flow." European J.Pharmacology. (in press). (1998)

Hotta, H. 等人：“西洛他唑是一种选择性 cAMP 磷酸二酯酶抑制剂，可扩张视网膜动脉并增加视网膜和脉络膜血流量。”

Sakiyama,Y.et al.: "A stereotaxic method of anatomical localization by means of H_2^<15>O positron emission tomography applicable to the brain activation study in cats." Annals of Nuclear Medicine. 11. 315-319 (1997)

Sakiyama,Y.et al.：“一种通过 H_2^15O 正电子发射断层扫描进行解剖定位的立体定位方法，适用于猫的大脑激活研究。”

Budgell,B.et al.: "Neural regumatory mechanisms of blood flow in the vasa nervorum of the rat sciatic nerve." J.Autonomic Nervous System. 58. 213-214 (1996)

Budgell,B.et al.：“大鼠坐骨神经血管神经血流的神经调节机制。”

Hotta,H.et al.: "Stimulation of saphenous afferent nerve produces vasodilatation of the vasa nervorum via an axon reflex-like mechanism in the sciatic nerve of anesthetized rats." Neuroscience Research. 24. 305-308 (1996)

Hotta，H.等人：“刺激隐传入神经可通过麻醉大鼠坐骨神经中的轴突反射样机制产生神经血管的血管舒张。”