イネ発芽種子のエンドペプチダーゼ:発現制御及び翻訳後プロセシング
发芽水稻种子中的肽链内切酶:表达调控和翻译后加工
基本信息
- 批准号:08640834
- 负责人:
- 金额:$ 1.41万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
イネ発芽種子中のエンドペプチダーゼ活性は疎水性クロマトグラフィにより主要な2画分に分離でき、これらはREP-1及びREP-2と名付けられた。REP-1については、さらに精製を進め、単一の酵素タンパク質として単離した。REP-1の部分精製標品を用いて、イネ種子中の貯蔵タンパク質の約80%を占めるグルテリンの消化実験を行った。疎水性クロマトグラフィによって部分精製したREP-1標品を酵素として使用した場合、グルテリンの酸性及び塩基性両サブユニットは経時的に減少することが認められた。またREP-1のN末端アミノ酸20残基を決定し、そのcDNA(pRP60と命名)を単離して塩基配列を決定した。さらに、これと類似のcDNAを得てpRP-80と名づけ、全塩基配列を決定した。pRP60cDNAの塩基配列から導き出されるアミノ酸配列には、シグナル配列につづく推定プロ領域が存在し、オオムギ発芽種子の分泌性エンドペプチダーゼEP-Bと同様にREP-1も多段階の翻訳後プロセシングを受けることが推定された。次に、pRP60及びpRP80mRNAの植物ホルモンによる発現応答の解析を行った結果、ジベレリン及びアブシジン酸による両mRNAの発現制御が示された。また、ゲノムライブラリーからそれぞれの遺伝子を得てRep1及びRepAと名づけ、塩基配列を決定した。cDNAとの比較からRep1にはイントロンが存在せず、RepAは5つのエキソンから成ることが示された。また両遺伝子の上流域には、イネ科種子のα-アミラーゼ遺伝子などで報告されているジベレリン応答の保存配列は見いだされなかった。
The main two components of the seed are isolated, REP-1 and REP-2. REP-1 is an enzyme that is refined and refined. Some of REP-1's refined standards are used in the process of digestion, accounting for about 80% of the total quality of the storage medium. The REP-1 standard is purified from water and reduced in acidity and basicity when used. The N-terminal amino acid 20 residue of REP-1 was determined, and the nucleotide alignment of the cDNA(pRP60) was determined. The cDNA sequence of pRP-80 was determined by DNA sequencing. The pRP60 cDNA sequence is a putative domain for the secretion of pRP60, and the same is true for REP-1. Analysis of the expression of pRP60 and pRP80 mRNA in plants and the expression of pRP60 and pRP80 mRNA in plants To determine the base alignment of Rep1 and RepA, please select Rep1 and RepA. Rep1 and Rep5 are the same. The results of the study showed that the seed of the plant was preserved in the upper reaches of the river.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kim,J.W.,Minamikawa,T.: "Expression and characterization of endopeptidase in suspension-cultured cells of French bean." Biosci.Biotech.Biochem.(in press.). (1997)
Kim,J.W.,Minamikawa,T.:“法国豆悬浮培养细胞中肽链内切酶的表达和表征。”
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- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kato,H.,Minamikawa,T.: "Identification and characterization of a rice cysteine endopeptidase that digests glutelin." Eur.J.Biochem.239. 310-316 (1996)
Kato,H.,Minamikawa,T.:“消化谷蛋白的水稻半胱氨酸内肽酶的鉴定和表征。”
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:
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