トラフグの単生類ヘテロボツリウムに対する免疫応答に関する研究

虎河豚对单殖异肉毒杆菌的免疫反应研究

• 批准号: 08660222
• 负责人: 小川 和夫
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08660222/
• 关键词: トラフグ; Heterobothrium okamotoi; ELISA; 抗体産生; 単生類; 寄生虫

養殖トラフグの鰓や鰓腔壁に寄生する単生類ヘテロボツリウムの感染による被害が産業上の問題になっている。そこで対策の一環として、ヘテロボツリウムに対するトラフグの体液性免疫反応を明らかにすることを目的とした。1.トラフグに抗原としてヤギIgGを接種し、産生された抗体を精製した。これをウサギに注射して抗トラフグIgM抗体を精製した。つぎに、成虫虫体を清浄海水で洗浄後、ホモジナイズして、その遠沈上清をアジュバントとともに腹腔内に接種し、3週後に追加免疫を施し、ヘテロボツリウム抗体陽性魚を作出した。対照群は抗原液のかわりにリン酸緩衝液を同様に接種した。ホモジナイズした虫体を抗原として上記の2群の魚の血清と反応させ、次いで抗トラフグIgMウサギIgGと反応させた後、Horseradish peroxidaseでラベルされた抗ウサギIgGヤギIgGを作用させ、吸光度を測定するELISAシステムを確立した。2.熊本県で養殖されていたトラフグ(1歳;13尾)のヘテロボツリウム寄生状況を調査した。鰓(幼虫)および鰓腔壁(成虫)における寄生数はそれぞれ0〜300、0〜54で、寄生数に違いはあったが、すべての魚が寄生を受けていた。これらの魚の血清の抗体価を前項で確立したELISAによって測定したところ、すべての魚について前項の抗原接種魚よりも高い抗体価を保持していた。一方、感染歴のない静岡県産の繁殖トラフグ(0歳;5尾)からは抗体は検出されなかった。今回の結果は外部寄生性の単生類の感染によって抗体産生が確認された初めての例である。抗体産生は、成虫の後半部分が鰓腔壁組織内に埋没するように寄生するという本虫の特性によるものと思われる。

Breeding ト ラ フ グ の gill や gill chamber wall に parasitic す る 単 raw class ヘ テ ロ ボ ツ リ ウ ム の infection に よ る murdered の が industry problems に な っ て い る. One part そ こ で policy の seaborne と し て, ヘ テ ロ ボ ツ リ ウ ム に す seaborne る ト ラ フ グ の humoral immune against 応 を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. Youdaoplaceholder0 antigen と てヤギ てヤギIgGを inoculated を, された antibody を refined た た. <s:1> れをウサギに injection of <s:1> anti-ト ラフグIgM antibody を refining of <s:1> た. つ ぎ に, into the insect insect body を で after at sea, at ホ モ ジ ナ イ ズ し て, そ の far on shen qing を ア ジ ュ バ ン ト と と も に intra-abdominal に に additional immunization vaccination し, 3 weeks later を し, ヘ テ ロ ボ ツ リ ウ ム antibody positive fish を make し た. Inoculate <s:1> た in the same way as the group of <s:1> antigenic solution <s:1> にリ わ にリ にリ <s:1> acid buffer を に. ホ モ ジ ナ イ ズ し た worm を antigen と し て written の 2 group of の fish の と serum anti 応 さ せ, い で resistance ト ラ フ グ IgM ウ サ と ギ IgG anti 応 さ せ た, Horseradish Peroxidase で ラ ベ ル さ れ た resistance ウ サ ギ IgG ヤ ギ IgG を role さ せ, determination of absorbance を す る ELISA シ ス テ ム を establish し た. 2. Investigation on the parasitic status of 県で たトラフグ たトラフグ たトラフグ(1 year old;13 tails) in kumamoto 県で breeding を ヘテロボ リウム リウム を た. Gill (larvae) お よ び gill chamber wall (adult) に お け る parasitic number は そ れ ぞ れ 0 ~ 300, 0 ~ 54 で, parasitic に violations い は あ っ た が, す べ て の fish が parasitic を by け て い た. こ れ ら の fish の の serum antibody 価 を で referred to in the preceding paragraph shall establish し た ELISA に よ っ て determination し た と こ ろ, す べ て の fish に つ い て の antigen referred to in the preceding paragraph shall be vaccinated fish よ り も high い antibody 価 を keep し て い た. One party, infection history: な な shizuoka 県 produces <s:1> reproduction トラフグ(0 years old;5 tail) ら ら ら antibody 検 検 されな った った. This time, the <s:1> results showed that <s:1> external parasitic <s:1> 単 biosimilar <s:1> infection によって antibodies produced が, confirming された initial めて である cases である. Second part antibodies は, adult の が gill cavity wall tissues に buried す る よ う に parasitic す る と い う this worm の features に よ る も の と think わ れ る.