低分子量GTP結合蛋白質,Rab,の心房筋細胞における局在と機能

Rab（一种低分子量 GTP 结合蛋白）在心房肌细胞中的定位和功能

• 批准号: 08670021
• 负责人: 飯田 弘
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670021/
• 关键词: 低分子量GTP結合蛋白質; 小胞輸送; 分泌顆粒; 心房筋細胞; Rab蛋白質

本研究の主たる目的は、心房性Na利尿ホルモンを分泌する心房筋細胞,及び他の内分泌・外分泌細胞における低分子量GTP結合蛋白質,Rab,の発現を調べ、それらの細胞内局在を明らかにすることである。ノザン解折及びRT-PCR解折によって、ラット心房組織にはyeastのSec4近縁のrab6,rab10,rab12及びrab13 isoformsの発現が認められた。rab6,rab8,rab10,rab12に対する抗ペプチド抗体を作製し、仏ノブロットを行なった所、心房筋組織から精製した分泌顆粒分画に、抗rab6抗体で24kDaの蛋白が、抗rabに抗体で28kDの蛋白が検出された。^<32>P-GTP overlagアッセイによってこれらの蛋白質は低分子量G蛋白であることが確認された。ラット心房組織の凍結切片を作製し、蛍光抗体法及び免疫電顕法によってrab6とrab12の細胞内局在を調べた所、rab6は心房筋細胞のゴルジ装置及び分泌顕粒膜、rab12は分泌顕粒膜にassociateしていることが判明した。またアガロースに包埋した分泌顆粒を用いimmunodiffusion法による免疫電顕によっても同様の所見を得た。さらにラット膵外分泌・細胞より精製した分泌顆粒にrab6がassociateしていることもわかった。これらrab蛋白質の機能について現在研究を進めている。

Purpose this study の main た る は, atrial Na diuresis ホ ル モ ン を secretion す る atrial muscle cells, and び he の endocrine, exocrine cells に お け る low molecular weight GTP binding protein, made Rab, の 発 を べ, now そ れ ら の cells inside bureau in を Ming ら か に す る こ と で あ る. Youdaoplaceholder0 <s:1> dissociation and びRT-PCR dissociation of によって and ラット atrial tissue に が yeast <s:1> Sec4 is associated with <s:1> rab6,rab10,rab12 and びrab13 isoforms, and が recognition められた is observed. Rab6, rab8 rab10, rab12 に す seaborne る resistance ペ プ チ ド し, the antibody を cropping 仏 ノ ブ ロ ッ ト を line な っ た, atrial muscle tissue by か ら refined し た secretory granules で 24 points draw に, resistance to rab6 antibody kda protein の が, rab に 28 kd antibody で の protein が 検 out さ れ た. ^ < > 32 P - GTP overlag made ア ッ セ イ に よ っ て こ れ ら の は low molecular weight protein G protein で あ る こ と が confirm さ れ た. ラ ッ ト の freezing slice を atrial organizations for し, 蛍 び optical method of antibody and immune 顕 method に よ っ て rab6 と rab12 の cells inside bureau in を adjustable べ た, rab6 は atrial muscle cells の ゴ ル ジ device and secretion び 顕 granulosa, rab12 は secretion 顕 granulosa に associate し て い る こ と が.at し た. ま た ア ガ ロ ー ス に embedding し た secretory granules を with い immunodiffusion method に よ る immune electric 顕 に よ っ て も with others seen の を た. さ ら に ラ ッ ト Cui, exocrine cells, よ り refined し た secretory granules に rab6 が associate し て い る こ と も わ か っ た. The <s:1> function of the を れらrab protein に れら て て て て is now being studied in を めて る る る.