P_2-プリン作動性受容体による心筋ムスカリン性Kチャネルの制御機構の解明

阐明P_2-嘌呤能受体对心脏毒蕈碱K通道的控制机制

• 批准号: 08670057
• 负责人: 松浦 博
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670057/
• 关键词: パッチクランプ法; モルモット心房筋細胞; P_<2Y>-受容体; ムスカリン性Kチャネル; ATP; セカンドメッセンジャー

酵素処理により得られたモルモット心房筋細胞において、P_2-プリン作動性受容体(P_2-受容体)によるムスカリン性K(K_<ACh>)チャネルの抑制性制御機構についてパッチクランプ法による全細胞膜電流記録(whole-cell recording)実験により検討を行った.K_<ACh>チャネル電流の活性化は細胞外acetylcholine(5.5-11μM)またはadenosine(100μM)投与,もしくは細胞内GTP-γS(100-200μM)投与により行った.P_2受容体刺激は細胞灌流液(細胞外液)中に種々のATPanalogueを投与する事により行った.本研究により以下の点が明らかになった.1.種々のP_2-アゴニストによるK_<ACh>電流の抑制作用の有効性の順位は,ATP≧2-methylthio-ATP>α,β-methylene-ATPであり,P_<2Y>-受容体の関与が示唆された.2.細胞外ATPによるK_<ACh>電流の抑制効果の発現は比較的遅く最大反応に達するまで約60-70秒を要し,その情報伝達機構に細胞内を拡散するセカンドメッセンジャーの関与が示唆された.3.H-7(20μM)にて前処理した細胞においても細胞外ATPはK_<ACh>電流を抑制したため,プロティンキナーゼCの関与は否定的であった.4.BAPTA(20mM)の細胞内投与によっても,細胞外ATPによるK_<ACh>電流の抑制効果は影響を受けなかったため,細胞内Ca^<2+>もまた関与していないと考えられた.以上まとめると,P_<2Y>-受容体刺激はK_<ACh>チャネルをプロティンキナーゼCおよび細胞内Ca^<2+>以外の何らかのセカンドメッセンジャーを活性化して抑制していると考えられる.

Enzyme processing is the most important aspect of the treatment. P_2-P_1-ACTIVITY RECEPTOR Whole-cell membrane current recording using the inhibitory control mechanism of the Karion-like K (K_) cell (P_2-receptor) method (whole-cell recording)(5.5 - 11 μ M) adenosine (100 - 200 μ M). P_2 receptor stimulated the cell perfusion (extracellular fluid).<ACh><ACh>1. The order of the inhibitory effect of P_2-methylthio-ATP on K_current is ATP&gt; 2-methylthio-ATP&gt; α, β-methylene-ATP. 2. The maximum response time of the inhibition effect of extracellular ATP on K_current was about 60 - 70 seconds. The information transmission mechanism in the intracellular dispersion of the information transmission mechanism in the cellular communication system. 3.H-7 (20 μ M) Before treatment, extracellular ATP and K_current were inhibited. 4. BAPTA (20 mM) and intracellular ATP and K_current inhibition effect, intracellular Ca ^&lt;2 +&gt; and Ca ^&lt;3 +&gt;.<ACh><2Y><ACh><ACh><ACh>P-receptor stimulation of K_c_c<2Y><ACh>

项目成果

Matsuura,H.: "Modulation of the muscarinic K^+ channel by P_2-purinoceptors in guinea-pigatrial myocytes." Journal of physiology. 472(2). 379-393 (1996)

Matsuura,H.：“豚鼠肌细胞中 P_2-嘌呤受体对毒蕈碱 K^ 通道的调节。”