心筋細胞のP_2-プリン受容体により活性化される電流系の特性とその生理的意義の解明

阐明心肌细胞P_2-嘌呤能受体激活的电流系统的特性及其生理意义

• 批准号: 05670048
• 负责人: 松浦 博
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670048/
• 关键词: モルモット心房筋細胞; パッチクランプ法; P2-プリン作動性受容体; 遅延整流性カリウム電流; ムスカリン性カリウム電流; 細胞内情報伝達系; 百日咳毒素感受性G蛋白

酵素処理により得られたモルモット心房筋細胞にパッチクランプ法による全細胞膜電流記録を行い、P2-プリン作動性受容体によるカリウム電流の調節について検討した.細胞外ATPもしくはADPによるP2-プリン作動性受容体刺激により1..遅延整流性カリウム電流の増大、および2.ムスカリン性カリウム電流の活性化が起こることを見いだした.またこれらのカリウム電流の調節に関与する細胞内情報伝達系について検討を加えた.細胞を百日咳毒素にて前処置すると遅延整流性カリウム電流の増大反応は不変であったが、ムスカリン性カリウム電流の活性化は消失した。すなわちP2-プリン作動性受容体によるムスカリン性カリウム電流の活性化には,百日咳毒素感受性G蛋白が関与していることがわかった.またbアドレナリン性刺激薬であるイソプレナリンで遅延整流性カリウム電流を最大限に増強した後で,細胞外ATPによりP2-プリン作動性受容体を刺激してみると遅延整流性カリウム電流はさらに増加することがわかった.これはP2-プリン作動性受容体による遅延整流性カリウム電流の増大反応に,Aキナーゼが関与していないことを示唆する興味深い実験結果である.電極内に20mMのBAPTA存在下においても,P2-プリン作動性受容体刺激により遅延整流性カリウム電流が増大したため細胞内Caは関与は否定的であった.また単一チャネル電流記録を行い,P2-プリン作動性受容体刺激により平均開口時間が約1ms,単一チャネルコンダクタンスが約50pSのカリウムチャネルが活性化されることを見いだし、単一チャネルレベルでP2-プリン作動性受容体によるムスカリン性Kチャネルの活性化を確認した.これらの研究成果は1993年8月英国グラスゴーで開催されたXXXIInd International Congress of Physiological Scienceにおいてシンポジストとして発表した。

Enzyme 処 Richard に よ り have ら れ た モ ル モ ッ ト atrial muscle cells に パ ッ チ ク ラ ン プ method に よ る full membrane current record を い, P2 - プ リ ン actuation sex by let body に よ る カ リ ウ ム の adjust current に つ い て beg し 検 た. Extracellular ATP く く ADPによるP2-プリ <s:1> actiative receptor stimulation によ によ 1.. 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム current の raised large, お よ び 2. ム ス カ リ ン sex カ リ ウ ム current の activeness が up こ る こ と を see い だ し た. ま た こ れ ら の カ リ ウ ム の adjust current に masato and す る intelligence 伝 in cells of department に つ い て を 検 please add え た. Cell を pertussis toxin に て 処 before buy す る と 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム の raised large current anti 応 は - not で あ っ た が, ム ス カ リ ン sex カ リ ウ ム current の activeness は disappear し た. す な わ ち P2 - プ リ ン actuation sex by let body に よ る ム ス カ リ ン sex カ リ ウ ム current の activeness に は, pertussis toxin sensitivity G protein が masato and し て い る こ と が わ か っ た. ま た b ア ド レ ナ リ ン sexual stimulation 薬 で あ る イ ソ プ レ ナ リ ン で 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム current を the deadline に raised strong し た で, extracellular ATP に よ り P2 - プ リ ン under let body を actuation sex し て み る と 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム current は さ ら に raised plus す る こ と が わ か っ た. こ れ は P2 - プ リ ン actuation sex by let body に よ る 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム の raised large current anti 応 に, A キ ナ ー ゼ が masato and し て い な い こ と を in stopping す る tumblers deep い be 験 results で あ る. Presence of electrode に within 20 mm の BAPTA に お い て も, P2 - プ リ ン under let body actuation sex に よ り 遅 spreading rectifier カ リ ウ ム が raised large current し た た め intracellular Ca は masato and は negative で あ っ た. ま た 単 a チ ャ ネ ル line current record を い, P2 - プ リ ン under let body actuation sex に よ り が about 1 ms average opening time, 単 a チ ャ ネ ル コ ン ダ ク タ ン ス が about 50 ps の カ リ ウ ム チ ャ ネ ル が activeness さ れ る こ と を see い だ し, 単 チ ャ ネ ル レ ベ ル で P2 - プ リ ン actuation sex by let body に よ る ム ス カ リ ン sex K チ ャ ネ ル の activeness を confirm し た. こ れ ら の research は in August 1993, the British グ ラ ス ゴ ー で open rush さ れ た XX XIInd International Congress of Physiological Scienceにお にお てシ ポジストと ポジストと て て release た た

项目成果

松浦 博: "家兎心室筋細胞における再濾流不整脈の発生機序 -活性酸素によるCa負荷と異常自動能の発現-" Jpn.Circ.J.57. 1336-1340 (1993)

Hiroshi Matsuura：“兔心室肌细胞再滤过性心律失常的机制 - 由于活性氧导致的 Ca 负荷和异常自律性的表达 -”Jpn.Circ.J.57 (1993)。

Ehara,T.: "Single-channel study of the cyclic AMP-regulated chloride current in guinea-pig ventricular myocytes." J.Physiol.464. 307-320 (1993)

Ehara,T.：“豚鼠心室肌​​细胞中环磷酸腺苷调节氯电流的单通道研究。”

松浦 博: "活性酸素によるCa^<2+>負荷と一過性内向き電流の発現" Therapeutic Res.14. 108-115 (1993)

Hiroshi Matsuura：“活性氧引起的Ca^2+负荷和瞬时内向电流的表达”Therapeutic Res.108-115(1993)。

Shattock,M.J.: "Measurement.of Na^+-K^+ pump current in isolated rabbit ventricular myocytes using the whole-cell voltage-clamp technique inhibition of the pump by oxidant stress." Circ.Res.72. 91-101 (1993)

Shattock，M.J.：“使用氧化应激抑制泵的全细胞电压钳技术测量离体兔心室肌细胞中的 Na^ -K^ 泵电流。”