腎糸球体荒廃過程での成長因子・細胞外マトリックスの解析

肾小球恶化过程中生长因子和细胞外基质分析

• 批准号: 08671311
• 负责人: 大澤 源吾
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671311/
• 关键词: 糸球体上皮細胞; Bowman嚢上皮細胞; FGF2; Dominant negative FGFR; WT1蛋白; Osteopontin

1.FGF2と糸球体上皮細胞障害 糸球体上皮細胞が障害された後、Bowman嚢上皮細胞の増殖反応が観察され癒着病変が形成される。この病的反応にFGF2が関与することを明らかにし、糸球体上皮細胞をPuromycin(PAN)にて障害後FGF2を投与により蛋白尿の増加、糸球体上皮細胞障害の増強、Bowman嚢上皮細胞の増殖が観察され、中和抗体投与により蛋白尿の減少、癒着病変形成の抑制が観察された。2.Dominant Negative(DN)FGF受容体発現によるメサンギウム細胞増殖の抑制 培養メサンギウム細胞増殖は、FGF2添加により増殖が観察される。FGF受容体1、2のKinase domainを取り除いたcDNAを作成し、培養メサンギウム細胞に発現させた。その発現をRT-PCRで確認した後、FGF2添加による増殖作用への影響を観察した。DNFGF受容体では増殖作用の抑制が観察された。3.半月体形成とFGF2の役割 抗GBM抗体腎炎モデルにおいて、半月体形成細胞や、その周囲細胞の(Bowman嚢周囲)に、FGF2やその受容体のmRNAの発現が観察された。主に発現している細胞は、αSmooth mscule actin陽性の細胞であった。4.糸球体上皮細胞障害とWT1蛋白の関連 正常糸球体上皮細胞は、核内にWT1蛋白の発現が観察される。糸球体上皮細胞をPuromycin(PAN)にて障害すると、多核上皮細胞が観察され、その細胞ではWT1蛋白の発現の減少が観察された。この背景には、WT1蛋白の細胞周期調節への関与を示唆している。5.糸球体管外病変とOsteopontin(OP)の発現 半月体形成腎炎モデル、巣状糸球体硬化モデル、メサンギウム細胞増殖腎炎モデルにおいて、管外病変部に接着蛋白OSmRNAが観察され、その周辺部にマクロファージや単球の浸潤が観察され、OSの糸球体荒廃過程細胞浸潤への関与が示唆された。

1. FGF2 and the proliferation of Bowman's epithelial cells were observed after the injury of spherical epithelial cells. FGF2 is associated with the development of this disease, and FGF2 administration after Puromycin(PAN) inhibition in human epithelial cells increases proteinuria, increases Puromycin(PAN) inhibition in human epithelial cells, and increases proliferation of Bowman epithelial cells. Neutralizing antibody administration decreases proteinuria, and inhibits the development of this disease. 2. Dominant Negative(DN)FGF receptor development is monitored by cell proliferation inhibition culture and FGF2 addition. The Kinase domain of FGF receptor 1 and 2 was extracted and cDNA was generated. After RT-PCR confirmation, the effects of FGF2 addition on proliferation were investigated. Inhibition of DNFGF receptor proliferation was observed. 3. The expression of mRNA in semilunar body formation and FGF2-mediated anti-GBM antibody nephritis, semilunar body formation cells, peripheral cells, and FGF2-mediated receptors was observed. The cells with αSmooth muscule actin positive were found in the host cells. 4. The association between WT1 protein and apoptosis in human glomerular epithelial cells The expression of WT1 protein in normal glomerular epithelial cells and nuclei has been observed. The Puromycin(PAN) protein was detected in human spherical epithelial cells, multinucleated epithelial cells, and decreased expression of WT1 protein was detected in other cells. This background indicates that WT1 protein is involved in cell cycle regulation. 5. The development of semilunar glomerulonephritis due to extraductal disease and Osteopontin(OP) is characterized by glomerular sclerosis, glomerular cell proliferation and glomerulonephritis.

项目成果

Kato H,et al: "Detection of osteopontin mRNA in epithelial cells of Bowman's capsule as revealed by in situhybridization" Kawasaki Med J. 22. 187-195 (1996)

Kato H 等人：“通过原位杂交揭示鲍曼氏囊上皮细胞中骨桥蛋白 mRNA 的检测”Kawasaki Med J. 22. 187-195 (1996)

Jyo Y,et al: "FGF2 augmens crescent formation in rat anti-GBM glomerulonephritis" J Am Soc Nephrol. 7. 1659 (1996)

Jyo Y 等人：“FGF2 增强大鼠抗 GBM 肾小球肾炎中新月体的形成”J Am Soc Nephrol。

Hatta H,et al: "Nuclear lesions of glomerular epithelial cells and expression of WT-1 protein" J Am Soc Nephrol. 7. 1733 (1996)

Hatta H 等人：“肾小球上皮细胞的核病变和 WT-1 蛋白的表达”J Am Soc Nephrol。