角膜内皮機能障害に対する遺伝子治療法の開発

角膜内皮功能障碍基因治疗的进展

• 批准号: 08672010
• 负责人: 山下 英俊
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672010/
• 关键词: 角膜上皮; 角膜内皮; 透明性; 創傷治癒; 細胞周期; TGF-βスーパーファミリー; 塩素イオンチャネル; 受容体

角膜の透明性維持のためには角膜内皮細胞及び上皮細胞の構造、機能が保たれていることが重要である。本研究では上記2種類の細胞の機能制御におけるサイトカイン、増殖因子の影響を検討するためにTGF-βスーパーファミリーの各因子及びその受容体の発現を観察した。角膜上皮、内皮両細胞ともに、TGF-β1、2、3を発現していた。さらに受容体としては、TGF-βI型受容体,II受容体、アクチビンI、IA型受容体,II受容体、骨形成因子(BMP)IA、IB型受容体,II受容体、ALK-1が発現しており、多くの因子によりその機能が多重に制御されていることが示唆された。角膜上皮細胞を剥離してその創傷治癒モデルをラット角膜で作成し上皮細胞の再生過程でのTGF-βスーパーファミリーの働きを検討したところ、上皮細胞が遊走、進展する際にはTGF-β1、2、3および受容体は発現しているが、上皮が創傷部を覆った時期には一時的に受容体の発現が低下し、上皮の層状化に際しては再び受容体が発現することが示された。これらのことより上皮創傷治癒過程においてTGF-βは初期の細胞遊走進展及び後期の上皮細胞の分化に関与することが示された。角膜内皮細胞は角膜透明性維持のためには主要な働きをしている。コンフルエントな条件ではG0/G1期で停止している。その制御メカニズムを検討した。細胞周期をG0/G1期からS期へと進行させる因子としてTGF-β1、2が有効でありアクチビンAは促進、抑制双方の作用が見られなかった。TGF-β1、2が細胞周期進行の作用機序としてはPDGFを介する二次的な作用であることが分かった。機能分子としての水及びイオンチャンネルのクローニングは牛角膜内皮細胞ライブラリーから現在塩素イオンチャンネルの一部フラグメントがPCR法を用いた研究から得られて、その全長を得るべく研究が進行している。角膜内皮細胞が何らかの因子を分泌する機能を有することが示唆されている。

为了维持角膜的透明度，保持角膜内皮细胞和上皮细胞的结构和功能很重要。在这项研究中，观察到TGF-β超家族的每个因素的表达及其受体，以研究细胞因子和生长因子对两种细胞功能调节的影响。角膜上皮和内皮细胞都表达了TGF-β1、2和3。此外，受体包括TGF-β型I型，II受体，II受体I，启动素I，II受体II受体，II受体，成骨因子（BMP）IA，IA，IB受体，II受体，II受体和ALK-1型，以及它们的功能。将角膜上皮细胞分离，并在大鼠角膜中创建伤口愈合模型，以检查上皮细胞再生过程中TGF-β超家族的功能。结果表明，当上皮细胞迁移和发育时，TGF-β1、2、3和受体会表达，但是当上皮覆盖伤口时，受体表达暂时降低，并且上皮层层次时，受体再次表达。这些结果表明，在上皮伤口愈合过程中，TGF-β参与了早期细胞迁移进展和晚期上皮细胞分化。角膜内皮细胞在维持角膜透明度中起主要作用。在汇合条件下，它被悬浮在G0/G1相。检查了控制机制。 TGF-β1和2是将细胞周期从G0/G1转变为S相的有效因素，而激活素A未显示促进或抑制作用。发现TGF-β1和2是由PDGF介导的次级作用，作为细胞周期进程的作用机理。现在，使用牛角膜内皮细胞库的某些氯离子通道的某些片段的PCR方法获得了水和离子通道作为功能分子的克隆，并且正在进行研究以获得全长。已经提出角膜内皮细胞具有分泌某个因素的功能。

项目成果

Hidethoshi Yamashita et al: "Bone Morphogenetic Protein Receptors" Bone. 19(6). 569-574 (1996)

Hidethoshi Yamashita 等人：“骨形态发生蛋白受体”骨。

山下 英俊・他: "角膜創傷治癒とTGF-β" 臨床 眼科. 51(発表予定). (1997)

Hidetoshi Yamashita 等人：“角膜伤口愈合和 TGF-β”临床眼科 51（待出版）。