網膜芽細胞腫におけるTGF-βスーパーファミリーの生理的機能の解析

TGF-β超家族在视网膜母细胞瘤中的生理功能分析

• 批准号: 08672049
• 负责人: 堀江 公仁子
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672049/
• 关键词: 網膜芽細胞腫; Y79細胞; WERI細胞; TGF-β; TGF-βI型受容体; TGF-βII型受容体; 受容体発現; 遺伝子導入

本研究により,網膜芽細胞腫におけるTGF-β受容体の発現と生理的意義について,本年度中に以下の内容を明らかにし,第100回日本眼科学会総会および第12回国際眼研究会議において学会発表を行った。今後,本研究の結果を論文発表する予定である。1)網膜芽細胞種細胞株であるY79細胞およびWERI細胞において,TGF-βI型受容体mRNAの発現はノーザン解析で確認されたが,TGF-βII型受容体mRNAの発現はほとんど認められなかった。現在,これら細胞において,TGF-β受容体ゲノムDNAの解析を群馬大学外科学教室と共同で行っている。2)[125I]標識TGF-βを用いた分子間架橋結合法・免疫沈降法では,網膜芽細胞腫細胞ではTGF-βII型受容体蛋白の発現は認められなかった。3)網膜芽細胞腫細胞において,TGF-β1による細胞増殖抑制の効果は,MTTアッセイ法では認められなかった。4)網膜芽細胞腫細胞において,TGF-βのシグナル伝達の下流分子であるsmad分子が細胞質から細胞核に移行しうるか,特異的抗体を用いた免疫組織化学的方法を本年度中に確立することができた。さらに細胞に各種の刺激やTGF-β受容体遺伝子を発現させることにより,smad分子の動きが明らかになるか検討をつづけたい。5)網膜芽細胞腫細胞株へのTGF-β受容体遺伝子導入により,TGF-βによるPAI-1遺伝子のプロモーター領域を活性化する作用がみられるか,ルシフェラーゼ活性の測定を行った。TGF-βI型受容体・II型受容体を2つとも遺伝子導入することにより,2〜3倍程度の活性上昇が認められ,この細胞で,受容体以降のシグナル伝達が保存されている可能性が示唆された。現在さらに効率のよい方法で遺伝子導入する実験系を確立しつつある。本研究により,網膜芽細胞腫においてはTGF-βリガンドの感受性が認められないのは,II型受容体の発現の欠如ないし低発現が原因として最も考えられ,受容体遺伝子導入により,TGF-βのシグナル伝達機構が正常に作動する可能性が強く示唆された。本研究は,臨床的に網膜芽細胞腫の腫瘍増殖抑制機構を解明しようとするものであり,腫瘍の遺伝子治療の可能性にもつながり,極めて重要な意義を有している。

The purpose of this study is to show the physiological significance of TGF-β receptors in omental blastomatosis and to show the physiological significance of this year.容を明らかにし,第100回日本眼科学会総会および第12回国際眼研究会議において学会発表を行った。 From now on, the results of this research will be published in a thesis. 1) Omental bud cell seed cell line Y79 cells, WERI cells, TGF-β type I receptor mRNA The analysis and confirmation of TGF-β type II receptor mRNA are as follows: Now, analysis of DNA of cells and TGF-β receptors is conducted by the Department of Surgery, Gunma University. 2) [125I] identifies TGF-β using intermolecular bridging method and immunoprecipitation method, and recognizes TGF-β type II receptor protein in omental blastoma cells. 3) Omental bud cell tumours, TGF-β1 and cell proliferation inhibitory effect, MTT method and its effects. 4) Omental bud cell swollen cells, TGF-β molecule, smad molecule, cytoplasm The migration of cell nuclei has been confirmed, and specific antibodies have been established this year using immunohistochemistry. Various types of stimulation of cells and TGF-β receptor residues are present.とにより, smad molecule の动きが明らかになるか検question をつづけたい. 5) Omental blastocytoma cell line, TGF-β receptor genetically introduced TGF-β receptor, TGF-β, TGF-β, PAI-1 The activity of the remaining areas is determined by the activity of the active area and the activity of the active area. TGF-β type I receptors and type II receptors are introduced into TGF-β receptors, and the activity is 2 to 3 times higher The rise and fall of the cell, the receptor and the fall of the body will save the possibility of survival. Now, the efficiency of the method and the introduction of the system into the system have been established. In this study, TGF-β リガンドのsensitivity, omental bud cell swelling, and type II receptor receptors are low. The reason is that the test is the best, the recipient body is imported into the body, and the TGF-β system has the possibility of normal operation and the possibility is strong. In this study, the mechanism of clinical suppression of omental blastocytosis and tumor growth is explained.あり, the possibility of treatment of tumors and ulcers is にもつながり, it is extremely important and meaningful and there is している.

项目成果

宮園浩平編(堀江公仁子他): "細胞増殖因子療法 12章 眼疾患と細胞増殖因子(堀江執筆分)" メデイカルレビュー社, 333 (1996)

宫园晃平（堀江公子等人）编辑：“细胞生长因子治疗第12章眼部疾病和细胞生长因子（堀江撰写）”医学评论公司，333（1996）