歯胚と軟骨の石灰化機構に関する研究

牙胚和软骨钙化机制的研究

• 批准号: 08672082
• 负责人: 名和 橙黄雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672082/
• 关键词: Tooth qerm; cartilaqe; Meckel's cartilage; Calcification; Tissue culture

(1)軟骨細胞の培養による骨形質発現に関する研究:本来は消失すべき運命にあるマウス下顎メッケル軟骨を単離細胞培養法によって4週間培養すると、細胞は典型的な軟骨細胞から小型の細胞へと転換し、これらの細胞は強いアルカリホスファターゼを示すようになる。さらに、細胞が分泌する細胞外基質は免疫組織化学的にはtype II collagenからtype Icollagenへと転換し、骨タンパクマ-カの一つであるオステオカルシンの出現することが判明した。この結果に基づいて、培養細胞数を0.5×10^4個と2×10^4個として培養すると、高濃度培養法では基質形成が明らかに促進さされ、それにともなって軟骨細胞の骨細胞への形質転換の促進されれることが明瞭になった。(2)enamel-free areaの発現に関するエナメル芽細胞の動態に関する研究:ラットenamel-free areaの内エナメル上皮機能を明らかにするために、下顎第一臼歯を用いて、in situ hybridization法によりアメロジェニンmRNAの発現について検索した。その結果、enamel-free areaの内エネメル上皮の未分化な時期にはアメロジェニンは発現しないが、分化期のエナメル芽細胞には強く発現する。しかしながら、enamel-free areaでは生後1日から3日の極性を有する低分化型の円柱形の内エナメル上皮にのみ弱陽性の反応が認められた。この結果、enamel-free areaの内エナメル上皮は典型的なエナメル芽細胞よりは反応が弱いが、明らかにアメロジェニン合成能を有し、その合成能は生後1日から3日の短期間に限定されていることが判明した。(3)歯胚培養による歯根形成に関する研究:マウス臼歯のセメント質形成をin vitroで観察する新しい器官培養法を開発した。この培養では培養43日までに、有細胞セメント質様の層が形成され、電子顕微鏡、X線微小分析の結果、培養によって新たに形成されたこの層はセメント質ときわめて相似であり、石灰化していることが確認された。

(1)Study on bone morphology development in chondrocyte culture: The cells were transformed from typical chondrocytes to small chondrocytes after 4 weeks of culture. Immunohistochemical analysis of extracellular matrix (ECM) secreted by cells revealed the presence of type II collagen, type II collagen and type II collagen. The results showed that the number of cultured cells was 0.5×10^4 and 2×10^4 respectively, and the matrix formation was promoted by high concentration culture method. (2) Study on the development of enamel-free area related to the development of cell dynamics: the development of cell epithelial function in enamel-free area, the development of cell mRNA in situ hybridization method. As a result, the enamel-free area of the endodermic epithelium during the undifferentiated period is not developed, and the differentiation period of endodermic cells is not developed. In the case of poorly differentiated columnar epithelium, weak positive reaction was observed on the 1st and 3rd day after birth. As a result, the inner epithelium of enamel-free area is typical of bud cells, and the synthetic energy is limited to 1 day and 3 days after birth. (3)A new method of organ culture was developed to investigate the formation of dental roots in vitro. The culture was carried out for 43 days, and the formation of a layer with cell quality was confirmed by electron microscopy and X-ray microanalysis.

项目成果

K.Ishizeki,Y.Hiraki,M.Kubo,T.Nawa: "Sequential synthesis of cartilage and bone marker proteins during transdifferentiation of mouse Meckel's cartilage chondrocytes" Int.J.Dev.Biol.41(印刷中). (1997)

K.Ishizeki、Y.Hiraki、M.Kubo、T.Nawa：“小鼠梅克尔软骨细胞转分化过程中软骨和骨标记蛋白的顺序合成”Int.J.Dev.Biol.41（出版中）。

K.Ishizeki,M.Takigawa,T.Nawa and F.Suzuki: "Mouse Meckel's cartilage chondrocytes evoke bone-like matrix and further transform into osteocyte-like cells in culture." The Anatomical Record. 245. 25-35 (1996)

K.Ishizeki、M.Takikawa、T.Nawa 和 F.Suzuki：“小鼠 Meckel 软骨细胞在培养物中诱发骨样基质并进一步转化为骨细胞样细胞。”

K.Ishizeki,Y.Hirai,H.Kim,F.Suzuki,T.Nawa: "High-density cultured of mouse Meckel's cartilage cells stimulates phenotypic conversion to osteocyte-like cells." J.Bone and Mineral Metabolism. 14. 202-213 (1996)

K.Ishizeki、Y.Hirai、H.Kim、F.Suzuki、T.Nawa：“高密度培养小鼠梅克尔软骨细胞可刺激表型向骨细胞样细胞的转化。”

K.Ishizeki,T.Chida,H.Yamamoto,T.Nawa: "Light and electron microscopy of stage-specific feature of the transdifferentiation of mouse Meckel'cartilage chondrocytes in vitn" Acta Anatomica. (印刷中). (1997)

K.Ishizeki、T.Chida、H.Yamamoto、T.Nawa：“小鼠 Meckel 软骨细胞在玻璃中转分化的阶段特异性特征的光学和电子显微镜”Acta Anatomica（1997 年出版）。