Porhyromonas gingivalis LPSによるB細胞活性化機構の解析

牙龈卟啉单胞菌LPS激活B细胞机制分析

• 批准号: 08672186
• 负责人: 島内 英俊
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672186/
• 关键词: Porphyromonas gingivalis; lipopolysaccharide (LPS); LPS低応答性; B細胞; LPSレセプター; シグナル伝達

有力な歯周病原性細菌の一つであるPorphyromonas gingivalis由来のリポ多糖(LPS)は、その構造ならびに生物学的活性において古典的な腸内細菌由来LPSと比べて大きく異なることが知られている。その特徴的な生物活性の一つとして、遺伝的にLPS低応答性であるC3H/HeJマウス脾細胞を活性化、増殖させることが従来より報告されているが、同LPSによるC3H/HeJ細胞活性化の機構はいまだ明らかにはされていない。そこで本研究ではC3H/HeJ脾細胞からB細胞を純化することにより、同LPSのB細胞への結合からシグナル伝達へと至る細胞活性化機構について解明しようとした。本研究の結果、P.gingivalis LPSはLPS低応答性C3H/HeJマウスのB細胞に対して、LPS応答性C3H/HeN B細胞と同様にマイトジェン活性ならびにIL-6産生誘導活性を発揮することを明らかにした。また、protein kinase阻害剤を用いた結果から、P.gingivalis LPSによるC3H/HeNおよびC3H/HeJ B細胞からのIL-6産生の誘導には、E.coli LPS刺激C3H/HeN B細胞と同様にtyrosine kinase、protein kinase Cならびにcyclic AMP/GMP-dependent protein kinaseの経路を介してるものと考えられる。さらに、P.gingivalis LSP刺激後にC3H/HeNおよびC3H/HeJ B細胞においてチロシン、セリン/スレオニンのリン酸化蛋白がみられ、E.coli LPSによるB細胞の活性化と同様にtyrosine kinaseおよびserine/threonine kinaseの活性化が関与していることが示唆された。したがって、P.gingivalis LPS刺激によるC3H/HeJ B細胞活性化経路はE.coliのそれと同一の経路を介すると考えられる。また、C3H/HeNのみならずC3H/HeJ B細胞においても、P.gingivalis LPSならびにE.coli LPSと結合する73-kDa蛋白が認められた。これらの結果は、P.gingivalis LPSとE.coli LPSとの差異が73kDa蛋白質への結合からシグナル伝達に至る過程において存在することを示すものであり、P.gingivalis LPSのC3H/HeJ B細胞の活性化には、その活性中心であるlipid Aを含めてE.coli LPSとは異なるLPS構造が深く関わっているものと考えられる。

The origin of the powerful periapical pathogenic bacteria, polysaccharides (LPS), and the structure of the bacteria, and the biological activity of the bacteria in the intestine, are known to be different from each other. The biological activity of C3H/HeJ cells is characterized by LPS hyporesponsiveness, and the mechanism of C3H/HeJ cell activation and proliferation is also reported. Therefore, this study provides insights into the purification of C3H/HeJ spleen cells and B cells, the interaction with LPS and B cells, and the mechanisms for cell activation. The results of this study indicate that P. gingivalis LPS has the same activity as LPS hyporesponsive C3H/HeJ B cells and IL-6 induction activity in LPS responsive C3H/HeN B cells. The induction of IL-6 production in C3H/HeN and C3H/HeJ B cells stimulated by P.gingivalis LPS and the pathway of tyrosine kinase, protein kinase C and cyclic AMP/GMP-dependent protein kinase in C3H/HeJ B cells stimulated by E.coli LPS were investigated. In addition, the activation of tyrosine kinase and serine/threonine kinase in B cells stimulated by P.gingivalis LSP is related to the activation of C3H/HeN and C3H/HeJ B cells. C3H/HeJ B cell activation pathway mediated by LPS and E.coli C3H/HeN and C3H/HeJ B cells were identified as 73-kDa proteins in E.coli LPS and P. gingivalis LPS. The results showed that the difference between P.gingivalis LPS and E.coli LPS was 73kDa protein binding, the protein binding, the protein binding, the