歯の移動時の圧迫側、牽引側歯根膜細胞におけるhsp27遺伝子発言の検索

寻找牙齿移动过程中受压侧和牵引侧牙周膜细胞中 hsp27 基因的表达

• 批准号: 08672357
• 负责人: 須佐美 隆史
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672357/
• 关键词: hsp27; Waldo法; 歯根膜; 歯の移動

歯の移動という歯科矯正学の最も基本的な過程において、物理的な力が化学的構造を変化させる際に重要と考えられるhsp27の発現を検索する目的で以下の実験を行った。ラット右側上顎第1大臼歯、第2大臼歯間にWaldoの方法に従ってゴムを挿入し、反対側同部位を対照とした。ゴム挿入2時間後、上顎を摘出し、10%ホルマリンに固定を4時間施行した後、5%EDTA/6%Sucrose溶液に標本を浸漬して、4℃にて1カ月間脱灰した。脱灰終了後、通法に従ってアルコール脱水、パラフィン包埋を行い、5μmの薄切切片を作成した。これら切片に対し、抗hsp27抗体を用いて免疫染色を行い、光学顕微鏡にて観察した。その結果、対照側歯根膜においては、歯頚部付近、歯根中央部、根尖付近いずれにおいても、ごく限られた細胞に少量のhsp27の発現が観察されたにとどまった。これに対して、実験側ではいずれの部位においても、圧迫側、牽引側を問わず、多量のhsp27の発現が観察された。従って、ラット上顎大臼歯においては、歯間部へのゴム挿入という機械的ストレスにより、歯根膜でhsp27が多量に発現することが確認された。現在、歯根膜内のどの様な細胞がどの程度のhsp27を発現するかの詳細を検討すべく、薄切切片の質を向上させて検討するとともに、最長14日後までの経時的な発現パターンを観察することを試みている。また、同様な薄切切片を用いて、hsp27のcDNAをプローブとしたin situハイブリダイゼーションも行う予定である。一方、イヌまたはヒトを用いた歯の移動の実験により、mRNAの発現レベルを検索する目的で、RT-PCRも行うことを考えている。

The most fundamental processes of tooth movement and orthodontics include chemical, physical, and structural transformations. The following objectives are pursued: The method of Waldo between the first and second maxillary teeth on the right side of the jaw is described in detail below. After 2 hours of immersion, the upper jaw was extracted, 10% of the ash was fixed, 4 hours of immersion, 5% EDTA/6% Sucrose solution was immersed, and 4℃ was removed for 1 month. After the ash removal, the process of dehydration, embedding, and 5μm thin sections were performed. The sections were stained with anti-hsp27 antibodies and examined by optical microscopy. A small amount of hsp27 was observed in the middle of the tooth. This is the case with the HSP27, which is detected in the middle part of the body, the pressure part and the traction part. This is confirmed by the presence of a large number of teeth in the maxillary root canal and the presence of a large number of teeth in the dental root canal. Now, the detailed analysis of the degree of hsp27 in the root membrane, the qualitative analysis of the thin section, and the observation of the degree of hsp27 in the root membrane after 14 days. The cDNA of hsp27 was used in the preparation of thin sections. The expression of mRNA in the mRNA of the target gene was detected by RT-PCR.