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阻害剤をプローブとするアロマターゼの解媒機能解析

以抑制剂为探针分析芳香酶分解功能

基本信息

批准号：
08672527
负责人：
沼沢光輝
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Tohoku Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、我々が開発した阻害剤である天然基質androstenedione(AD)の3-デオキシ体と6-アルキル体や5-en-7-oneステロイド等をプローブとして、アロマターゼ触媒機能の解析を目的とした。まず、3-デオキシADと5-en-7-one体の19-水酸化体と19-オキソ体を、dehydroepiandrosteroneを出発原料として合成に成功した。次いで、これらの19-水酸化体を常法に従い、対応する脱メチル化体(△^<10(1)>体)へ誘導した。また、6-アルキルADと6-オキソADの2,2-ジメチル体の19位酸素化体を合成するには至らなかった。これら合成された19-酸素化体と△^<10(1)>体のGC-MSを検討した結果、水酸基をTMS又はIPDMS等のシリルエーテルに、カルボニル基をメトキシムに誘導することにより、高感度に定量可能であった。次に、ヒト胎盤ミクロゾームを酵素源として、NADPH存在下阻害剤をそれぞれインキュベートした。6-アルキルADについては、6-アルキルエストラジオールをbis-TMS誘導体として、また、他の基質では19-酸素化体や△^<10(1)>体の生成をそれぞれGC-MSにて分析した。その結果、6-アルキルADの芳香核化のK_m値と拮抗阻害剤としてのK_i値との間には有意な相関がないことや、6α-アルキル体が6β-異性体に比較し、より効率的に芳香核化されることなどが明らかとなった。他方、3-デオキシADは、ADに比べれば効率は低いものの、19位酸素化反応を受けるが、脱メチル化体の△^<10(1)>体へには変換しないことも判明した。しかし、本研究では、5-en-7-one体の19位酸素化反応を検出することができなかった。以上、アロマターゼの触媒機能について新しい知見が得られるとともに、阻害剤としての特性と基質としての機能との関係を、本研究で初めて明らかにすることができた。

The purpose of this study is to analyze the function of natural androstenedione(AD). The synthesis of 19-hydroxy-3-hydroxy-5-en-7-one and 19-hydroxy-3-hydroxy-5-en-7-one was successful. In the second place, the 19-hydroacidified substance was induced by the usual method, and the deacidified substance (△^<10(1)>) was induced by the usual method. The synthesis of the 19-position amino acid derivative of the 6-amino acid derivative of the 6-amino acid derivative of the 2,2-amino acid derivative of the 6-amino acid The GC-MS results of the synthesis of 19-amino acid derivatives, TMS and IPDS are discussed in detail. In the presence of NADPH, the enzyme source and the inhibitor are all present in the placenta. 6-A-D-D, 6-A-D-D, bis-TMS, and other substrates were analyzed by GC-MS for the production of 19-A-D-D. The results show that the K_m value of aromatic nucleation in 6-α-AD and the K_i value of antagonistic inhibitor are significantly correlated with each other, and the comparison between 6α-α-AD and 6β-AD is significant. Other, 3-digit AD, AD ratio is low, 19-digit acid conversion is low, 19-digit In this study, the 5-en-7-one amino acid sequence of the 19-position was identified. The above, the catalyst function, the new knowledge and the relationship between the characteristics and the functions of the inhibitor, this study is the beginning of the study.