プロスタグランジンF_<2α>受容体調節タンパク質の生理機能と作用メカニズムの解明

阐明前列腺素F_<2α>受体调节蛋白的生理功能和作用机制

• 批准号: 10169207
• 负责人: 坂本 和一
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169207/
• 关键词: プロスタグランジンF_<2α>; 受容体; 調節タンパク質; 発情周期; 黄体; イソフォーム

本研究は、プロスタグランジン(PG)F_<2α>受容体(FP)に作用して受容体機能を制御するタンパク質(FPRP)に着目し、この調節タンパク質の生理機能とシグナル伝達の制御メカニズムについて明らかにすることを目的として行った。まずPCR法やハイブリダイゼーション法によりラットとウシのFPRPのcDNAクローンを単離・解析したところ、FPRPは分子量約100KDの糖タンパク質で、N端側にイムノグロブリン様ループ構造を持ち、細胞質にC端側が突き出た一回膜貫通型構造を持つことが判明した。またノーザンプロット解析によりmRNAの発現を調べると、FPRPはFPと同様に主に卵巣、子宮および肺で強く発現し、特に妊娠期(6日目)ラットの卵巣中で強い発現がみられた。そこで、未成熟ラット(雌)に性ホルモン(PMSGおよびhCG)を投与して黄体形成を誘導し、経時的に卵巣および子宮を摘出してFPRPの発現を定量PCR法により解析を行ったところ、FPRPはFPと同様に発情周期依存的に発現が変化し、黄体形成期に上昇し黄体細胞のアポトーシス(退縮)に先だって発現量の減少がみられた。さらに、RT-PCR法を用いてウシ黄体cDNAライブラリーをスクリーニングしたところ、PGF_<2α>受容体のイソフォームのcDNAクローンが数種類単離出来た。これらのインフォーム受容体は、Altemative RNA splicingによりアミノ酸配列の異なるC末構造を持ち、しかも組織や黄体形成の時期特異的に各々異なる発現様式を示すことが分かった。このFPRPはFPのC末端のアミノ酸配列を特異的に認識して作用することから、FPRPがFP各イソフォームと共役して複数のシグナル伝達系を制御してことが考えられる。現在、FPイソフォームとFPRPおよびこれらの欠失変異体のcDNAを用い、細胞膜上におけるタンパク質間の相互作用とシグナル伝達制御との関連を調べており、黄体細胞や子宮内膜細胞の増殖およびアポトーシスの制御にFPRPがどの様に関わっているのかを明らかにしているところである。

The purpose of this study is to determine the effectiveness of the target system (PG). The recipient of the receptor (FP) can control the target of the recipient (FPRP). The physiological mechanism can achieve the goal of monitoring the performance of the recipient. The PCR method was used to detect the molecular weight of 100KD sugar, the molecular weight of FPRP, the molecular weight of 100KD, the molecular weight of carbohydrate, the molecular weight of 100KD, the molecular weight of glucose, the molecular weight of DNA, the molecular weight of glucose, the molecular weight of DNA, the molecular weight of glucose, the molecular weight of glucose, the molecular weight of DNA, the molecular weight of glucose, the molecular weight of glucose, the This is the first time to analyze the symptoms of mRNA, FPRP, FP, pregnancy, pregnancy, pregnancy (6 days), pregnancy (6 days), pregnancy (6 days). The corpus luteum was induced by PMSG, immature and immature oysters (female), and the corpus luteum was extracted from the ovum at that time. The quantitative PCR method was used to analyze the relationship between the epigenetic cycle dependence of FPRP FP and the epigenetic cycle. During the formation of corpus luteum, corpus luteum cells and corpus luteum cells were divided into two groups. The cDNA and RT-PCR methods were used to isolate several kinds of drugs, such as corpus luteum, PGF_<2 α and gt; recipients. In this case, the capacitor, the Altemative RNA splicing device, the terminal device, and the time-specific display of the luteal corpus luteum are displayed in each device. The FPRP, FP, C-terminal, acid, acid, and so on, the special functions of the FPRP, the FPRPFP, the common labor, the complex numbers, the control, the test, the control, the control, At present, FP is responsible for the use of cDNA, the interaction between cell membrane and cell membrane, and the regulation of cell proliferation in the inner membrane of the cell. At present, the control of the interaction between the cell membrane and the cell membrane of the FPRP cell has been achieved by the use of the cDNA, the interaction between the cell membrane and the cell membrane.