プロスタグランジン受容体遺伝子のクローニング

前列腺素受体基因的克隆

• 批准号: 05770108
• 负责人: 坂本 和一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770108/
• 关键词: プロスタグランジン; 受容体遺伝子; クローニング

我々は、かねてよりプロスタグランジン(PG)F_<2alpha>受容体の分子構造を明らかにするためにそのcDNAクローンの単離を試みてきたが、最近既知のプロスタノイド受容体の塩基配列を基にしてDNAポリメラーゼ連鎖反応(PCR法)及びクロスハイブリダイゼーション法等を用いてウシ黄体mRNAよりPGF_<2alpha>受容体のcDNAクローンの単離に成功した。2.2kbpの長さを持つこのcDNAクローンは、362アミノ酸の蛋白質翻訳領域を含み、他のプロスタノイド受容体同様典型的な7回膜貫通型構造を有していた。このcDNAクローンを動物培養細胞(COS細胞及びCHO細胞)中で発現させると[^3H]-PGF_<2alpha>に対する特異的な膜結合活性を示し、さらにアフリカツメガエル卵母細胞において典型的なCa^<2+>依存性Cl^-チャンネル電位の変化を示した事等から、このcDNAは機能的な受容体蛋白質領域を有するクローンであることが同定できた。更にノーザンハイブリダイゼーション及びIn Situハイブリダイゼーション等によりこの受容体mRNAの組織分布を調べると、従来の生化学的知見と同様にウシにおいては黄体組織に著しく局在することが判明した。現在このcDNAクローンを用いて、性周期及び妊娠各期のウシ黄体組織におけるPGF_<2alpha>受容体mRNAの発現量の変化を詳細に調べ、生殖生理現象におけるPGF_<2alpha>受容体の役割を明らかにしつつある。更にウシ及びヒトPGF_<2alpha>受容体のゲノムDNAを単離、解析することによりその転写調節に関与するDNA領域及びその転写調節因子を同定し、分子レベルで受容体遺伝子の発現調節のメカニズムを明らかにする予定である。

I don't know how to do this. I don't know. I don't know, I don't know. The molecular structure of the capacitor is known to be based on the PCR method (PCR method) and the successful isolation of the acceptor (PCR method), which is known recently that the capacitive body has been successfully isolated by using the PCR method and the PCR method, and so on, the capacitor molecule has been isolated from the receptacle. The general pattern of 2.2kbp receptor is the same as that of the typical 7-loop membrane, which is the same as that of the typical 7-loop membrane. 2.2kbp is responsible for the growth of acid protein in the field, and the receptor is the same as the typical 7-loop membrane. The membrane binding activity of COS cells (COS cells and CHO cells) is demonstrated by the membrane binding activity of [^ 3H]-PGF_<2alpha> cells, which is typical of Ca ^ and lt;2+&gt cells. Dependent Cl ^-the electronic potential of the system shows that the capacitive protein field of the cDNA machine has the same level as that of the capacitive body protein. In this paper, we study the distribution of recipient mRNA tissues, such as In Situ, biochemistry and luteal tissue, and so on. Now, the luteal tissue of luteal tissue of pregnant women in different periods of pregnancy, sexual cycle and pregnancy, the mRNA of mRNA receptor, the reproductive physiology and reproductive physiology of luteal tissue mRNA, PGF _ & PGF, PGF _ & PGF _. The PGF _ & lt;2alpha> acceptor does not require DNA to be isolated, parsed or parsed. It is the same as that in the field of DNA and in the field of PGF. The factor is the same as that of the PGF receptor.

项目成果

Kazuichi Sakamoto: "Molecular cloning and expression of a cDNA of the bovine prpstaglandin F2_<2alpha> receptor" Journal of Biological Chemistry. 269. 1-6 (1994)

Kazuichi Sakamoto：“牛prpstaglandin F2_<2α>受体的cDNA的分子克隆和表达”生物化学杂志。