プロテインキナーゼ活性化による細胞内サイトカイン産生に関する研究

蛋白激酶激活产生细胞内细胞因子的研究

• 批准号: 10169239
• 负责人: 日高 洋
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169239/
• 关键词: プロテインキナーゼ; PMA; ELISA; 妊娠・出産; サイトカイン; ヘルパーT細胞; Th1; Th2

ヘルパーT(Th)細胞は、サイトカインの産生様式および担う免疫反応により、2種類のサブセットに分けられる。Th1はIL-2、IFN-γなどのよる細胞性免疫、Th2はIL-4、IL-10などによる液性免疫を担っている。ヒトにおける研究は、サイトカイン血中濃度が現在の測定系では検出感度以下となるために十分には進んでいない。本研究では、まず、Protein Kinase C activatorであるPMAとIonomycinでリンパ球を刺激することにより、ELISAで測定可能なレベルのサイトカインを血漿中に分泌させることも可能であるかどうかを検討した。方法は末梢血をヘパリンの入った容器に採取し、PMAとIonomycinを加え、4時間〜96時間培養し、血漿中に分泌されたサイトカインをELISAで測定した。刺激する前の血漿中サイトカイン濃度は全てELISAの測定感度以下であった。刺激後12時間後より上清(血漿)中のサイトカインは検出可能となり、24時間後にピーク値を示した。以上よりヘパリン採血した末梢血をそのままPMAとIonomcinと共に培養することにより、血漿中のサイトカイン濃度がELISAで測定可能になることが明らかとなった。さらにこの方法を用いた具体的な応用例として、妊娠・出産によるサイトカイン産生能の変動を調べた。リンパ球によるサイトカイン産生能はIL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10全て出産後1-6か月の時期に著明に亢進していることが明らかになった。このことはなぜ自己免疫疾患が妊娠中軽快し、出産後に発症・増悪するのかという疑問に答える結果であった。以上の研究により、プロテインキナーゼを活性化することによりリンパ球のサイトカイン産生能を測定できることが明らかになった。本測定法は自己免疫性疾患、アレルギー疾患の病態解明などの検討にも有用であると考えられる。

ヘルパーT (Th) cells, サイトカインのproduces 様style およびうimmune response により, 2 types of のサブセットに分けられる. Th1, IL-2, IFN-γ, cellular immunity, Th2, IL-4, IL-10, liquid immunity. The current measurement system of ヒトにおける research and サイトカイン blood concentration is below the sensitivity and the となるために is very high and the んでいない. In this study, Protein Kinase C activatorであるPMAとIonomycinでリンパをstimulationすることにより、ELIS A measurement of possible なレベルのサイトカインを in plasma に secretion させることもpossible であるかどうかを検した. The method is to collect the peripheral blood into the container, add PMA to the ionomycin, After 4 to 96 hours of culture, secretion in plasma was measured using ELISA. The concentration of saline in the plasma before stimulation was below the sensitivity of the ELISA. After 12 hours after stimulation, the sterilized supernatant (plasma) of the sterilized liquid can be detected, and the sterilized liquid can be detected after 24 hours. The above is a collection of blood from peripheral blood, PMA, Ionomcin, and culture.により、The concentration of のサイトカイン in plasma can be determined by ELISA.さらにこの法を用いた Specific examples of な応 use として, pregnancy and childbirth によるサイトカインproduce energy の変动を Adjustment べた. Rinna ball can produce IL-2, IFN-γ, IL-4, IL- 10. The period of 1-6 months after delivery is the period of 1 to 6 months after birth.このことはなぜAutoimmune diseases, pregnancy symptoms, postpartum gynecological syndrome, questions and answers, and results. The above research was carried out on the activation of により and プロテインキナーゼをンパball のサイトカインproduced energy をmeasurementできることが明らかになった. This measurement method is useful for autoimmune diseases and autoimmune diseases.

项目成果

Yukihiko Watanabe: "Effect of solubilization of porcine thyrotropin(TSH)receptor on TSH binding and on radio-receptor assay for anti-TSH receptor antibodies." Biochemical and Biophysical Research Communications. 248・1. 110-114 (1998)

Yukihiko Watanabe：“猪促甲状腺素 (TSH) 受体的溶解对 TSH 结合和抗 TSH 受体抗体的放射受体测定的影响。” 248·1 (1998)。

Motoshi Okumura: "CD30 expression and IL-4 and IFN-γ production of intrathyroidal lymphocytes in Graves'disease." Thyroid. 発表予定. (1999)

Motoshi Okumura：“甲状腺内淋巴细胞的 CD30 表达和 IL-4 和 IFN-γ 生成。”（1999 年）。

Yoh Hidaka: "Increased serum concentration of interleukin-12 in patients with silent thyroiditis and Graves'disease." Thyroid. 発表予定. (1999)

Yoh Hidaka：“无症状甲状腺炎和格雷夫斯病患者血清白细胞介素 12 浓度升高。”（1999 年）。

Yukihiko Watanabe: "Polyethylene glycol increases the detection of anti-thyrotropin(TSH)receptor antiboies by a radioreceptor assay." Clinical Chemistry. 発表予定. (1999)

Yukihiko Watanabe：“聚乙二醇通过临床化学检测增加了抗促甲状腺激素 (TSH) 受体抗体的检测。”(1999)

Takashi Iijima: "Prediction of postpartum onset of rheumatoid arthritis." Annals of Rheumatic Diseases. 57・8. 460-463 (1998)

Takashi Iijima：“风湿性关节炎产后发病的预测”，《风湿病年鉴》57・8（1998）。