シンク器官におけるタンパク質リン酸による機能発現制御機構の解析

库器官磷酸蛋白功能表达调控机制分析

• 批准号: 10170226
• 负责人: 島田 浩章
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10170226/
• 关键词: イネ; プロティンキナーゼ; デンプン生合成; ショ糖代謝; アンチセンス植物; 種子登熟期; 胚乳

イネSPKは、登熟中期の未熟種子特異的に強く発現するカルシウム依存プロティンキナーゼである。本研究では、SPKの生化学的性質の解明を行なうとともに、アンチセンス植物などを利用して、SPKの機能、とくにシンク器官における貯蔵物質生合成への関わりについて解析した。まず、大腸菌蛋白発現系を利用し、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ(GST)との融合タンパク質としてSPKを調製した。得られたSPKタンパク標品はカルシウム依存性の蛋白質リン酸化活性を示した。次に、SPK遺伝子の発現をレポーター遺伝子を用いて調べたところ、SPKは未熟種子での強い遺伝子発現が認められた。また、葯や茎でも明らかな活性が認められた。未熟種子についてin situハイブリダイゼーションにより遺伝子発現を検定したところ、この遺伝子発現は胚乳特異的であることが明らかとなった。糊扮層や胚での遺伝子発現は認められなかった。一方、アンチセンスSPK遺伝子を導入したイネの未熟種子に現れた表現型について、蛋白質レベルでの変化を調べたところ、これらの未熟種子中ではほとんどの蛋白質生合成が抑制されていることが明らかとなった。花粉のデンプン蓄積にも強い阻害が見られた。そこで、デンプン生合成に関与する様々の酵素タンパク質に対するSPKのリン酸化活性を調べることで、SPKの基質特異性を解析した。その結果、SPKはショ糖代謝系の酵素のリン酸化活性を有することが明らかとなった。これらの結果から、SPKは未熟種子や花粉でのショ糖からデンプン蓄積への代謝経路に関与する制御因子であることが強く示唆された。

In the middle of the ripening period, the stress of the SPK and the unripe seeds in the mid-ripening period shows that they are dependent on each other. The purpose of this study is to understand the biological properties of SPK biochemistry. in this study, the biological properties of human organs and organs were studied, and the biological synthesis of organic compounds was studied in this study. in this study, the biological properties of SPK biochemistry were analyzed. The proteins of GST and Macrobrachium spp. are now used in the laboratory, and the fusion proteins are known as SPK proteins. The results showed that the protein was SPK dependent and the acidizing activity was indicated. In the second place, the SPK child will show that you are not in the market. If you want to use the child, you will find that the child is not ripe, and the SPK will not be ripe. The activity of the stem is very clear. The unripe cups are not well-known, and the endosperm characteristics of the endosperm are known to be known as the endosperm characteristics of the in situ. Pretend to be a baby, and you can see that you don't know what to do. On the one hand, the protein synthesis was inhibited by the inhibition of the synthesis of protein in the unripe seeds, on the one hand, in the uncooked seeds, on the other hand, in the unripe seeds, on the one hand, in the uncooked seeds, on the other hand, in the uncooked seeds, on the one hand, in the unripe seeds, on the other hand, in the unripe seeds, the protein biosynthesis was detected in the inhibition of the synthesis of proteins. The pollen grains are stored in a strong way to prevent the damage. The synthesis and characterization of SPK, SPK and SPK were studied. The results showed that the enzyme acidification activity of SPK glycosylation was significantly different from that of glycosylation. The results show that SPK immature seeds, pollen, sugar, sugar and sugar.