ホヤ胚の脊索形成にかかわる遺伝子カスケードの解析

海鞘胚胎脊索形成相关基因级联分析

• 批准号: 10171217
• 负责人: 高橋 弘樹
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10171217/
• 关键词: 脊索; ホヤ; Brachyury; T-box gene

今年度はホヤ胚の脊索形成に関わる遺伝子カスケードを解析するために、脊索で特異的に発現するマボヤAs-T(Brachyury)のシスエレメントとトランス因子の解析を行った.また、Brachyury遺伝子の下流で働く遺伝子を同定するために、マポヤの脊素細胞に特異的に発現する遺伝子の解析、および、カタユウレイボヤCi-Bra(Brachyury)によって発現が誘導される下流遺伝子群の解析を行った.1.As-Tの5'上流領域の解析:マボヤ受精卵へ顕微注入を行い、脊素特異的エンハンサーを含む領域を限定すると、上流領域-289bpではLacZ活性が脊素細胞のみで発現するが、,-270bpでは発現が見られない.さらにAs-T遺伝子が発現する原腸胚期の核抽出液中に、脊索での発現に必須な30bpの配列に特異的に結合する因子が存在した.また、As-T遺伝子の上流領域-171bPから-152bpの間に存在するBrachyury結合配列を除くと脊素での発現は検出されず、脊索細胞のみで発現する5'上流領域As-TLacZコンストラクトとAs-TmRNAを同時に顕微注入した胚では異所的にLacZ活性が検出されることから、As-T自身がAs-T遺伝子の発現をオートレギュレーションしている可能性が示唆された。2.Brachyury下流遺伝子の解析:マボヤ尾芽胚の尾部(脊索を含む)のみに発現する遺伝子として、脊素および神経索に発現し、SH2ドメインを含む新規遺伝子Hr-SH2をクローニングした。また、カタユウレイボヤのBrachyury(T)ホモログCi-Braをエレクトロポレーションにより過剰発現させ、Ci-Braによって発現が誘導される501クローンの下流遺伝子群を単離した.501全てのクローンについてin situハイブリダイゼーションを行い、脊索細胞で特異的に発現する遺伝子のcDNAクローンが48クローン含まれていることが明らかになり、現在これら遺伝子の解析を進めている.

This year, the notochordal formation of the embryo, the notochord, the notochord, the notochord, In the same way as in the same way as those in the spinal cord, the analysis of the Ci-Bra (Brachyury) of the spinal cord cell in the same way as that of the lower-level sub-group of the lower-stream sub-group. 1.As-T 5' upstream domain analysis: microinjection of fertilized eggs. The characteristic of spinal cord is limited by domain, upstream domain, 289bp, LacZ activity, spine cell, cell, and so on. -270bp customers are suffering from a bad situation. It was found that there must be a combination of 30bp and notochord factors in the nuclear extract of the original embryo stage of As-T. In the upstream field of As-T and 171bP computers, there is a combination of Brachyury and Brachyury to remove the output of spinal cord cells and the cell cycle of notochordal cells in the upstream field of As-TLacZ. At the same time, the activity of LacZ in the upstream field is detected by microinjection of the LacZ activity of the mouse embryo. As-T 's own "As-T" child shows that there is a possibility that it is not possible to tell you what to do. Analysis of 2.Brachyury downstream spores: the tail of tail germ (notochord containing notochord) was detected, the spinal cord was detected, and the SH2 was read. The new specification contains a new specification, Hr-SH2. Do you know what to do? The notochordal cell is very special. This is the cDNA cell. The notochordal cell is currently in the process of analysis.

项目成果

Takada, N.et al.: "Characterization of an asidian maternal T-box gene, As-mT" Int.J.Develop.Biol.42. 1093-1100 (1998)

Takada, N.等人：“asidian 母体 T-box 基因 As-mT 的表征”Int.J.Develop.Biol.42。

Takahashi, H.et al.: "An oscidian gene encoding an SH2 domain protein is expressed in the notochord cells of the embryo" Develop.Growth Deffer.40. 431-438 (1998)

Takahashi, H.et al.：“编码 SH2 结构域蛋白的 oscidian 基因在胚胎脊索细胞中表达”Develop.Growth Defer.40。

Hotta, K.et al.: "Expression of anascidian gene in the tip of the tail of tailbad-stage embryos" Develop.Genes Evol.208. 164-167 (1998)

Hotta, K. 等人：“tailbad 阶段胚胎尾尖中无鞘基因的表达”Develop.Genes Evol.208。