平滑筋細胞の分化におけるMEF2関連因子・新規転写因子の単離と解析

平滑肌细胞分化中 MEF2 相关因子和新型转录因子的分离和分析

• 批准号: 10177236
• 负责人: 森崎 隆幸
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10177236/
• 关键词: 転写因子; MEF2; 平滑筋; 分化; 遺伝子ターゲティング

本年度は平滑筋ミオシン重鎖遺伝子の発現制御に関わると報告されているが特異な発現パターンを示すMEF2B遺伝子を中心に検討した。すなわち、マウスMEF2B遺伝子の発現制御機構の解析、MEF2Bの遺伝子ターゲティング、平滑筋に発現するMEF2B関連遺伝子の探索を行った。まず、マウスMEF2B遺伝子のゲノムDNAを単離し、ルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとして含むベクターを構築し、種々の細胞に遺伝子導入を行って転写活性を検討した。マウスMBF2B遺伝子はCAATボックスが胚性細胞における高い転写活性に関与しており、また、上流約3kbに転写活性の増加をもたらすエンハンサーを認めた。また、遺伝子ターゲティングついてはMEF2B遺伝子欠損ホモマウスを得たが、MEF2B欠損ホモマウスはMEF2C欠損マウスとは異なり胎生致死とはならず、大きな異常は認めていない。さらに、抗MEF2B抗体を用いて平滑筋その他に発現するMEF2関連因子を探索し、cDNAライブラリーのスクリーニングを行った。抗MEF2B抗体を用いた検討で、MEF2B cDNAの大きさに相当する50kDaの蛋白は骨格筋細胞で認められるが胚性細胞では検出されず、胚性細胞では別の120kDaの蛋白が検出され、その蛋白は平滑筋細胞では増殖型細胞で検出されるが収縮型への分化に伴い発現は低下していた。一方、平滑筋cDNAライブラリースクリーニングではMEF2B遺伝子は単離されず、proline glutamine rich nuclear protein及びいくつかの機能不明な遺伝子が単離され、現在解析中である。今後、MEF2B遺伝子についての詳細な解析、また、平滑筋、胚性細胞において発現するMEF2B関連遺伝子についての詳細な検討が必要である。

This year's report on the development of MEF2B genes was reviewed. MEF2B gene discovery control mechanism analysis, MEF2B gene discovery, smooth muscle development of MEF2B related gene exploration MEF2B gene expression in the genome of a plant is characterized by the expression of DNA, DNA, and DNA. MBF2B gene expression is related to the increase of gene expression in embryonic cells, which is about 3kb. MEF2B is short of damage, MEF2C is short of damage, MEF2B is short of damage, MEF2C is short of In addition, anti-MEF2B antibodies were used to smooth out the expression of MEF2 related factors, and cDNA translation was carried out. Anti-MEF2B antibodies were used in the study. MEF2B cDNA protein of 50kDa was detected in embryonic cells, and 120kDa protein was detected in embryonic cells. MEF2B cDNA protein was detected in smooth muscle cells, and the differentiation of contractile cells was reduced. MEF2B gene is isolated from MEF2B gene, and the function of MEF2B gene is unknown. In the future, detailed analysis of MEF2B gene, smooth muscle and embryonic cell development will be necessary.

项目成果

Zahurul A.Bhuiyan: "Functional analysis of the p57^<KIP2> gene mutation in Backwith-Wiedermann syndrome" Hum.Genet.104(in press). (1999)

Zahurul A.Bhuiyan：“Backwith-Wiedermann 综合征中 p57^<KIP2> 基因突变的功能分析”Hum.Genet.104（印刷中）。

Takayuki Morisaki: "Molecular Analysis of mouse Ainpd3 gene encoding hearttype isoform of AMP deaminase" Ado.Exp.Med.Biol.431. 337-340 (1998)

Takayuki Morisaki：“编码 AMP 脱氨酶心型亚型的小鼠 Ainpd3 基因的分子分析”Ado.Exp.Med.Biol.431。

Kazuki Iida: "Expression of MEF2 genes during human cardiac development" Tohoku J.Exp.Med.187(in press). (1999)

Kazuki Iida：“MEF2 基因在人类心脏发育过程中的表达”Tohoku J.Exp.Med.187（印刷中）。

森崎隆幸: "心血管系の発生・分化に心筋を中心に分子機構の解明と分子療法の開発にむけて" 協和企画, 13(123-135) (1998)

Takayuki Morisaki：“阐明心血管系统发育和分化中的心肌的分子机制和分子治疗的发展”Kyowa Kikaku，13（123-135）（1998）

Hiroko Morisaki: "A novel gene,ITM,located between p57^<KIP2> and IPL,is impinted in mice" DNA Research. 5. 235-240 (1998)

Hiroko Morisaki：“一种新的基因，ITM，位于 p57^<KIP2> 和 IPL 之间，被印在小鼠体内”DNA Research。