原子間力顕微鏡による生きている肺癌細胞表面微細構造の経時観察及び遊走能との関係

原子力显微镜延时观察活体肺癌细胞表面超微结构及其与迁移能力的关系

基本信息

  • 批准号:
    10877095
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1998
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1998 至 1999
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

生きている状態の癌細胞の表面を原子間力顕微鏡で二千倍から一万倍の倍率で観察することに成功した。5分間トリプシン処理を行い細胞表面の微絨毛を剥離し,粘着剤にてコーティングしたスライドガラス上で肺癌細胞培養株A549を24時間培養した上で,原子間力顕微鏡にて細胞表面を観察した。二千倍での観察では細胞表面に稜上の隆起が存在した。この隆起は,細胞中心部から外縁に向かって放射状に拡がるものと外縁にそって同心円上にあるものの二種類が存在した。原子間力顕微鏡で観察した同一細胞をパラホルムアルデヒドで固定し,アクチンファイバーとチュプリンを蛍光二重染色したところ,放射線状に拡がる隆起と一致してアクチンが染色された。また,同心円上の隆起は,アクチンの他に一部チュブリンが染色された。以上の観察より,これらの隆起はアクチンやチュブリンからなる細胞骨格繊維をみていることが証明された。これらの隆起は,走査型電子顕微鏡では観察できず,原子間力顕微鏡の探子が細胞表面の構造を認識するときに細胞膜を僅かに圧迫するため,細胞膜直下にある細胞骨格繊維を稜上の隆起として認識していると思われた。また,一万倍での細胞表面の経時観察ではこれらの隆起が上下運動をしていることが観察され,細胞骨格は固定されたものではなく,流動していることがわかった。さらに,A549より遊走能の低いPC3でも,同様の観察を行ったが,原子間力顕微鏡で観察できた細胞表面の微細構造には遊走能の違いによる違いを認めなかった。
State of raw き て い る の cancer の surface を interatomic force 顕 micromirror で two thousand times か ら ten thousand times の ratio で す was 観 る こ と に successful し た. 5 points between ト リ プ シ ン 処 Richard を line い の cell surface microvilli を stripping し, adhesive tonic に て コ ー テ ィ ン グ し た ス ラ イ ド ガ ラ ス で on strain A549 lung cancer cell culture を 24 time cultivating し た で, interatomic force 顕 micromirror に て cell surface を 観 examine し た. Two thousand times the で 観 観 is found to be で で. On the に edges of the cell surface, there is a <s:1> bulge が and a た た. こ の uplift は, cell center department か ら outside try に to か っ て radial に company が る も の と outside try に そ っ て in concentric has drifted back towards &yen; に あ る も の の exist two kinds が し た. Interatomic force 顕 micromirror で 観 examine し た same cells を パ ラ ホ ル ム ア ル デ ヒ ド で fixed し ア ク チ ン フ ァ イ バ ー と チ ュ プ リ ン を 蛍 light double staining し た と こ ろ, stellerite に company が る uplift と consistent し て ア ク チ ン が dyeing さ れ た. Youdaoplaceholder0, the upper part of the concentric yen is raised in また, ア チ チ チ チ に he に a チュブリ が が staining された. Above の 観 examine よ り, こ れ ら の uplift は ア ク チ ン や チ ュ ブ リ ン か ら な る cells bone 繊 d を み て い る こ と が prove さ れ た. こ れ ら の uplift は, walkthrough type electronic 顕 micromirror で は 観 examine で き ず, interatomic force 顕 micromirror の spies が cell surface の tectonic を know す る と き に membrane を only か に 圧 forced す る た め, cell membrane by に あ る cells on bone 繊 d を cording の uplift と し て know し て い る と think わ れ た. ま た, ten thousand times で の cell surface の 経 観 when examine で は こ れ ら の uplift movement up and down が を し て い る こ と が 観 examine さ れ, cell skeleton は fixed さ れ た も の で は な く, flow し て い る こ と が わ か っ た. さ ら に, A549 よ り could wander の low い PC3 で も, with others in の 観 examine を line っ た が, interatomic force 顕 micromirror で 観 examine で き た cell surface の fine-structure に は can wander の violations い に よ る) い を recognize め な か っ た.

项目成果

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  • 通讯作者:
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