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凍結保存血管の移植後動脈硬化性病変に対する分子生物学的制御法の開発

冻存血管移植后动脉粥样硬化病变分子生物学调控方法的建立

基本信息

批准号：
10877208
负责人：
和田行雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

(目的)凍結保存した大動脈血管の移植を行い、移植後に発症する動脈硬化性変化の発症機序を分子生物学的に解析し、その知見をもとに硬化性病変の制御法開発の可能性を探ることを目的に本研究を遂行した。ラットの大動脈を採取、凍結保存し、同種移植モデルを作成した。(我々の研究グループで既にモデルの開発は終了している。)なお、平成10年度の研究結果より、移植後の動脈硬化性病変の進展には、アポトーシス誘導分子群の活性化、特に(Fas,FasL分子)の発現量が移植後1ヶ月まで、経時的に移植血管内皮細胞に増加し、同部位のアポトーシスの促進が誘導された。しかし、同時に抑制分子群によるアポトーシス抑制が、Bcl-2分子の発現で認められ、促進と抑制の両者のバランスが保たれながら動脈硬化性病変が進展していくことが明らかとなった。そこで、平成11年度の研究では、FasL分子とBcl-2分子の組み込みアデノウイルスベクター(pFasL/Adv-1,pbcl-2/Adv-1)を作成し、BNラットの大動脈内皮細胞に接触感染させ、その大動脈を用いて同種移植実験を行った。(結果)遺伝子導入効果を確立した至適条件下に、FasLとBcL-2の両遺伝子をBNラットの大血管に導入後、LEWラットの腹部に移植したが、無処置ラットの移植大動脈と比較して、移植後1ヶ月までは、TUNNEL陽性のアポトーシス内皮細胞は減少し、動脈硬化性病変の進展は抑制されたが、3ヶ月を過ぎると大動脈壁全層に浸潤細胞の増加と繊維化を認め、また、目的遺伝子の発現量も減少していた。(以上の結果に対して論文準備中)(結論)このin vivoでの解析によって、血管内皮細胞へのFasLとBcl-2の両遺伝子の適当量の発現が、同種血管移植後の動脈硬化性病変の進展に対して抑制効果を認めることが明らかとなった。今後は、長期間の発現量の維持を目的とする新しい遺伝子導入法の開発を行っていく予定である。

Objective: To analyze the molecular biological mechanism of atherosclerosis during transplantation and post-transplantation of cryopreserved arterial blood vessels, and to explore the possibility of developing a method to control atherosclerosis. The blood vessels were collected, frozen, and transplanted. (My research team has been working on the development of the project.) The results of this study in 2010 showed that the activation and expression of Fas,FasL molecules increased in vascular endothelial cells transplanted at 1 month and 1 hour after transplantation, and the induction of atherosclerosis was promoted in the same site. The expression of Bcl-2 is inhibited by the inhibition of molecular groups, and the expression of Bcl-2 is promoted by the inhibition of molecular groups. In 2011, we conducted a study on the formation of FasL and Bcl-2 molecular groups (pFasL/Adv-1,pbcl-2/Adv-1), and established contact infection with arterial endothelial cells and allotransplantation of these molecules. (Results) The results of gene introduction were established under appropriate conditions. FasL and BcL-2 gene were introduced into the large vessels of the aorta. After LEW gene was transplanted into the abdomen, the transplanted arteries without treatment were compared. One month after transplantation, TUNEL positive endothelial cells decreased, the progression of atherosclerotic disease was inhibited, and three months later, the invasive cells in the whole arterial wall increased. The number of target genes is reduced. (Conclusion) The analysis of FasL and Bcl-2 in vascular endothelial cells in vivo and the development of appropriate amount of Bcl-2 gene expression in vascular endothelial cells are important for the inhibition of progression of atherosclerotic disease after allogeneic vascular transplantation. In the future, the development of new gene introduction methods will be determined for the purpose of maintaining long-term development.