放射線高感受性Gorlin細胞におけるX線照射後のDNA合成異常上昇のメカニズム

辐射敏感Gorlin细胞X射线照射后DNA合成异常增加的机制

基本信息

  • 批准号:
    10878081
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1998
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1998 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ヒト細胞に放射線を照射すると多面的な応答がひき起こされるが、その一つとして、DNA合成能が大きく変動する。通常のほとんど全ての細胞ではDNA合成能は一担低下するが、本研究で材料としたGorlin症候群患者由来細胞(以下Gorlin細胞と記載)では全く逆の応答を示した。本研究では現在までに次の結果を得た。1. Gorlin細胞にX線を照射すると、照射後3時間をピークとしてDNA合成活性が上昇した。2. DNA合成活性の上がるX線照射3時間後に細胞の核小体の数が増加していた。この事実は、細胞解剖学的観察およびマーカー蛋白質を用いた免疫化学的解析も加えて確立された。3. Gorlin細胞においてX線照射後に発現量の変動する遺伝子を検索した。X線照射、非照射のGorlin細胞からmRNAをとりだし、differential display法を用いて発現が誘導あるいは抑制される遺伝子を検索した。24種類のプライマーの組み合わせにより、X線照射後に発現量の変化する17個のcDNAバンドが得られた。これらについて、その発現量の変化をRT-PCR法によって確認したところ、そのうちの1バンドから得たクローンが、X線照射後に増加するmRNAに対応するものであることが確かめられた。このcDNAの塩基配列を現在解析中である。
The radiation exposure of cells to radiation causes a multi-faceted response, and DNA synthesis can change greatly. In general, all cells have a low DNA synthesis capacity. In this study, cells derived from Gorlin syndrome patients (Gorlin cells described below) have a low DNA synthesis capacity. The results of this study were obtained. 1. Gorlin cells were irradiated with X-rays, and DNA synthesis activity increased 3 days after irradiation. 2. DNA synthesis activity increased after 3 hours of X-ray irradiation, and the number of nucleosomes increased. The results of this study are as follows: (1) The study of cytoanatomy, protein analysis and immunochemistry are established. 3. Gorlin cells are activated by X-ray irradiation, and gene expression is realized. X-ray irradiation and non-irradiation of Gorlin cells to detect mRNA expression, differential display method was used to detect and inhibit mRNA expression. 24 kinds of cDNA fragments were found after X-ray irradiation, and 17 cDNA fragments were found. RT-PCR method was used to confirm the mRNA expression level of the target gene. This cDNA sequence is currently being analyzed.

项目成果

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