増殖刺激後早期の細胞内マグネシウムの動態変化

增殖刺激后早期细胞内镁动态的变化

• 批准号: 05770073
• 负责人: 石嶌 純男
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770073/
• 关键词: 増殖刺激; マグネシウムイオン; 線維芽細胞; 蛍光色素; 蛍光顕微画像解析; カルシウムイオン; イオノフォア; カルシウムチャンネルブロッカー

マウスSwiss 3T3線維芽細胞を増殖刺激すると、早期に細胞内遊離Mg^<2+>濃度が上昇する。このMg^<2+>の増加は10秒以内に起こる一過性の初期相と、大部分は細胞の外からのMg^<2+>流入による30-60分後の第2相との二相性を示す。ここでは刺激直後に起こる一過性のMg^<2+>濃度上昇に焦点を絞り、細胞内でのMg^<2+>の遊離機構を解析した。遊離Mg^<2+>濃度の測定は、蛍光色素mag-fura-2と蛍光顕微画像解析装置Argus-100を用いて単一細胞レベルで行った。刺激は主として、ボンベシン-Swiss 3T3細胞系を用いた。1.細胞内Mg^<2+>遊離機構。細胞質内Mgの90%以上は各種のリガンド、特に40%はATPと可逆的に結合して存在する。しかし刺激後2分以内にATP濃度変化はみられず、Mg^<2+>上昇はATPよるものではない。さらにボンベシンにより細胞内はアルカリ化するが、弱塩基添加により細胞内をアルカリ化してもMg^<2+>濃度はほとんど変化せず、ボンベシンによるMg^<2+>上昇にも影響を与えなかった。一方、イオノフォアの一種であるイオノマイシンを加えるとMg^<2+>上昇がみられたが、ボンベシンあるいはイオノマイシンを加え2分後に他方を加えても二度目のMg^<2+>上昇はみられなかった。これは両者が同じMgプール、おそらくは膜系よりMg^<2+>を遊離させたことをしめしている。3.細胞外Ca^<2+>の役割。外液のCa^<2+>を除くとボンベシンによるMg^<2+>上昇の程度は六十%低下し、Caチャンネルブロッカーであるニカルジピンを加えるとMg^<2+>上昇は90%阻害された。このニカルジピンによるMg^<2+>上昇の低下は、外液のCa^<2+>濃度を上げることにより部分的に回復した。以上の結果は、ボンベシンが、細胞外Ca^<2+>に依存して早期に細胞内プールからMg^<2+>を動員することを示している。

MASWIS Swiss 3T3 line dimensional sprout cells stimulate proliferation and increase the concentration of free Mg^<2+> in early cells. The transient initial phase of Mg^<2+> increases within 10 seconds, and the second phase and dual phase of most cells flow into the cell within 30-60 minutes. After stimulation, the concentration of Mg^<2+> rises transiently, the concentration of Mg^<2+> is concentrated, and the free mechanism of Mg^<2+> in the cell is analyzed. The concentration of free Mg^<2+> was measured using the Argus-100 micro-image analysis device for the photopigment mag-fura-2. Stimulators were used for the primary stimulation and the use of the Tonkin-Swiss 3T3 cell line. 1. Intracellular Mg^<2+> free mechanism. In the cytoplasm, more than 90% of Mg is present in various compounds, especially 40% of Mg is reversibly bound to ATP. The ATP concentration changes and Mg^<2+> rises within 2 minutes after stimulation. Mg ^<2+>Concentration はほとんど変化せず, ボンベシンによるMg^<2+>Rise にも Impact を and えなかった. One party, イオノフォアの一kind of であるイオノマイシンを加えるとMg^<2+>rise がみられたが, ボンベシAfter 2 points of ンあるいはイオノマイシンを, the other party added えても二度目のMg^<2+> rose はみられなかった.これは両者が同じMgプール, おそらくは Film type よりMg^<2+>をFree させたことをしめしている. 3. Extracellular Ca^<2+> cleavage. The degree of increase in external fluid Ca^<2+> has been reduced to 60%, C aチャンネルブロッカーであるニカルジピンを加えるとMg^<2+> rises and blocks された. The このニカルジピンによるMg^<2+> rises and falls, and the concentration of the external fluid のCa^<2+> rises and げることにより part of the にrestores した. The above results show that the dependence of extracellular Ca^<2+> on early stage and intracellular Ca^<2+>mobilization of Mg^<2+> are shown in the figure.