線条体神経細胞でのドーパミン情報伝達系、特にD1/D2レセプター相互作用の解析

纹状体神经元多巴胺信号转导系统分析，特别是D1/D2受体相互作用

• 批准号: 11170250
• 负责人: 西 昭徳
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11170250/
• 关键词: 線条体; ドーパミン; 細胞内情報伝達系; リン酸化; DARPP-32; ギャップ結合

線条体に選択的に発現するDARPP-32(dopamine-and cAMP-regulated phosphoprotein,Mr 32kDa)は、ドーパミン作用が効率的に発現するために必須のリン酸化蛋白である。DARPP-32はThr34残基がプロテインキナーゼA(PKA)によりリン酸化されるとプロテインホスファターゼ1抑制蛋白として作用する。ドーパミンD1レセプター刺激ではPKAによるThr34残基リン酸化が促進されるが、D2レセプター刺激ではカルシニューリンによるThr34残基脱リン酸化が促進され、D1/D2レセプターはDARPP-32/Thr34残基リン酸化を拮抗的に調節する。しかし、D1/D2レセプターはそれぞれ線条体-黒質神経路神経細胞と線条体-淡蒼球神経路神経細胞に発現しているとされており、D1/D2レセプター相互作用のメカニズムは明らかではない。DARPP-32リン酸化を指標とした検討で、ギャップ結合抑制物質がDARPP-32/Thr34残基リン酸化調節におけるD1/D2レセプター相互作用を抑制するという結果を得た。線条体-淡蒼球神経路神経細胞に発現するD2レセプターは、ギャップ結合様構造を介して線条体-黒質神経路神経細胞のDARPP-32リン酸化を調節していると考えられる。また、DARPP-32抗体にて線条体神経細胞を免疫染色し共焦点レーザー顕微鏡にて解析した結果、神経細胞体間で細胞膜が接触する所見を数多く認めた。接触部位を電顕にて解析したところ、細胞膜は直接接触しており接触部位に一致して細胞内Ca^<2+>プールとして機能する表面下槽の構造を認めた。これらの結果は、ギャップ結合様構造や表面下槽を伴う細胞体接触が線条体神経細胞間コミュニケーションに関与することを示唆しており、引き続き機能的・形態学的解析をすすめている。

The line body に sentaku に 発 now す る DARPP - 32 (dopamine - and cAMP - regulated phosphoprotein, Mr 32 kda) は, ド ー パ ミ ン role が sharper rate に 発 now す る た め に must の リ ン acidic protein で あ る. DARPP - 32 は Thr34 residues が プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ A (PKA) に よ り リ ン acidification さ れ る と プ ロ テ イ ン ホ ス フ ァ タ ー ゼ 1 inhibit protein と し て role す る. ド ー パ ミ ン D1 レ セ プ タ ー stimulus で は PKA に よ る Thr34 residues リ ン acidification が promote さ れ る が, D2 レ セ プ タ ー stimulus で は カ ル シ ニ ュ ー リ ン に よ る Thr34 residue off リ ン acidification が promote さ れ, D1 / D2 レ セ プ タ ー は DARPP - 32 / Thr34 residues リ ン acidification を antagonism against the に す adjustment Youdaoplaceholder0. し か し, D1 / D2 レ セ プ タ ー は そ れ ぞ れ lines - black body quality, and the god 経 LuShen と line 経 cells - pale pale god 経 LuShen 経 cells に 発 now し て い る と さ れ て お り, D1 / D2 レ セ プ タ ー interaction の メ カ ニ ズ ム は Ming ら か で は な い. DARPP - 32 リ ン acidification を index と し た beg で 検, ギ ャ ッ プ combined with inhibiting substance が DARPP - 32 / Thr34 residues リ ン acidification adjust に お け る D1 / D2 レ セ プ タ ー interaction を inhibit す る と い た を う results. Line body - pale pale god 経 LuShen 経 cells に 発 now す る D2 レ セ プ タ ー は, ギ ャ ッ プ combined with others in を interface し て lines - black body mass god 経 LuShen 経 cells の DARPP - 32 リ ン acidification を adjust し て い る と exam え ら れ る. ま た, DARPP - 32 antibody に て line を god 経 cells in the immune dyeing し total focus レ ー ザ ー 顕 micromirror に て parsing し た results, god 経 が で membrane between the cell body contact す を る had seen many く recognize め た. を electric contact parts 顕 に て parsing し た と こ ろ, direct contact with the cell membrane は し て お り contact parts に consistent し て intracellular Ca ^ 2 + < > プ ー ル と し て function す る surface groove の tectonic を recognize め た. こ れ ら の results は, ギ ャ ッ プ combined with others under the surface groove を with や う が cell body contact line between body god 経 cells コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン に masato and す る こ と を in stopping し て お り and き 続 き function, morphology of parsing を す す め て い る.

项目成果

Nishi A et al.: "Regulation of Na^+, K^+-ATPase isoforms in rat neostriatum by dopamine and protein kinase C."J.Neurochem.. 73. 1492-1501 (1999)

Nishi A 等人：“多巴胺和蛋白激酶 C 对大鼠新纹状体中 Na + 、 K + -ATP 酶亚型的调节”J.Neurochem. 73. 1492-1501 (1999)

Nishi A et al.: "Role of calcineurin and protein phosphatase-2A in the regulation of DARPP-32 dephosphorylation in neostriatal neurons."J.Neurochem.. 72. 2015-2021 (1999)

Nishi A 等人：“钙调神经磷酸酶和蛋白磷酸酶 2A 在调节新纹状体神经元 DARPP-32 去磷酸化中的作用。”J.Neurochem.. 72. 2015-2021 (1999)

Higuchi E et al.: "Phosphorylation of protein phosphatase inhibitors, inhibitor-1 and DARPP-32, in renal medulla."Eur.J.Pharmacol.. 408. 107-116 (2000)

Higuchi E 等人：“肾髓质中蛋白磷酸酶抑制剂、inhibitor-1 和 DARPP-32 的磷酸化。”Eur.J.Pharmacol.. 408. 107-116 (2000)

Bibb JA et al.: "Phosphorylation of DARPP-32 by cdk5 modulates dopamine signalling in neurons"Nature. 402. 669-671 (1999)

Bibb JA 等人：“cdk5 磷酸化 DARPP-32 可调节神经元中的多巴胺信号传导”Nature。

Bibb JA et al.: "Phosphorylation of Protein Phosphatase Inhibitor-1 by Cdk5."J.Biol.Chem.. (in press). (2001)

Bibb JA 等人：“Cdk5 对蛋白磷酸酶抑制剂 1 的磷酸化”。J.Biol.Chem..（出版中）。