ノックアウトマウスを用いた筋ジストロフィーの中枢神経障害に関する分子生物学的研究

使用基因敲除小鼠进行肌营养不良中枢神经系统疾病的分子生物学研究

• 批准号: 11170264
• 负责人: 武田 伸一
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11170264/
• 关键词: alpha1-シントロフィン; nNOS; Aquaporin-4; 筋ジストロフィー; 筋形質膜; アストロサイト; 浸透圧; 血液脳関門

Duchenne型筋ジストロフィー(DMD)では知的障害を見ることがあるが病理学的には特異的な異常はなく、中枢神経障害の分子機構は明らかではない。ジストロフィン結合タンパク質の一つであるalpha1-syntrophinは、ジストロフィンの欠損に伴って発現が低下しているが、PDZドメインを介してチャンネル及びレセプター分子と分子間相互作用をしている可能性がある。我々は同分子のノックアウトマウスを作製し、これまでにalphal-syntrophinがnNOSを筋形質膜にアンカーリングしている事(Kameya S et al.,J.Biol.Chem.274:2193-2200,1999)を示した。次に同ノックアウトマウスを用い、骨格筋形質膜と共に脳アストロサイト足突起やグリアリミタンスにおいてalpha1-syntrophinが水チャネルのアクアポリン4を形質膜に局在化させていることを明らかにした。(Yokota T et al.,Proc J Acad 76:22-27,2000)さらにこれらの組織においては、アクアポリン4を構成するorthogonal array構造が減少していた。また、その生理学的な影響を検討するため骨格筋に対する浸透圧ショックの影響を検討したところ、単離した骨格筋組織の浸透圧ショック後の収縮張力が野生型よりも低下していた。これは、これまでジストロフィン欠損による筋ジストロフィーの発症機序において考えられてきた機械的な膜の障害説に対し新たな視点を与えるものである。更に、神経筋接合部(NMJ)においてalpha1-syntrophinが特に強く発現していることから、同ノックアウトマウスのNMJの構造やジストロフィン結合タンパク質の発現について検討した。同ノックアウトマウスではNMJのgutter及びfoldの構造が浅く、さらにfoldの数の減少が見られた。これらの異常は、ジストロフィン及びそのホモログタンパク質であるユートロフィンの局在の異常を伴っていた。これらのことより、alpha1-syntrophinが神経筋接合部におけるシナプス形成に関与していることが示唆された

The Duchenne-shaped tendons (DMD) are known to be harmful to the pathological characteristics of the disease, and the molecular mechanism of the central nervous system is sensitive to the disease. This method is used to detect the possibility of the interaction between molecules in the presence of alpha1-syntrophin, PDZ, and molecular interactions. We have the same molecular structure as the alphal-syntrophin nNOS fascia, the fascia. In the same way, the bone-shaped membrane is used in the same way, and the bone-shaped membrane is used in the same way. The foot protuberance is in the middle of the body, and the water is in the middle of the alpha1-syntrophin. (Yokota T et al.,Proc J Acad 76:22-27. 2000) the organization is responsible for reducing the number of people who need to pay attention to the orthogonal array. In the physiology, the bone tissue was soaked, the bone tissue was soaked, and the wild type was low. There is a lack of information on the mechanical properties of the machine, such as the membrane damage of the machine, the safety of the machine, the membrane of the machine, the damage of the machine. In addition, the NMJ joint (NMJ) is specially designed to make sure that there is a gap between the two parts, and that the connection between the two parts of the joint (NMJ) can be made in the same way as in the same way. In the same way, you can use the NMJ gutter and the fold to make the light and the fold count less. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. The joint of the tendon, the joint of the tendon, the formation of the tendon and the instigation of the tendon joint of the alpha1-syntrophin.

项目成果

Yamamoto K. et al.: "Immune response to adenoviral-delivered antigens upregulates utrophin..."Human Gene Therapy. (in press).

Yamamoto K. 等人：“对腺病毒传递的抗原的免疫反应上调 utropin……”人类基因疗法。

Yamamoto K et al.: "Immune response to adenoviral-delivered antigens upregulates utrophin....."Human Gene Therapy. 11. 669-680 (2000)

Yamamoto K 等人：“对腺病毒传递的抗原的免疫反应上调 utropin......”人类基因疗法。

武田伸一, 他: "筋肉細胞、遺伝子治療開発ハンドブック"株式会社 エヌ・ティー・エス. 1061 (1999)

Shinichi Takeda 等人：“肌肉细胞和基因治疗开发手册”NTS Co., Ltd. 1061 (1999)

Miyagoe-Suzuki Y. et al.: "Merosin and congenital muscular dystrophy"Microscopy Research and Technique. 48. 181-191 (2000)

Miyagoe-Suzuki Y.等人：“Merosin 和先天性肌营养不良症”显微镜研究和技术。

Inobe M et al.: "Identification of EPS8 as a Dvl1 associated molecule"Biochem Byophys Res Commu. 266. 216-221 (1999)

Inobe M等人：“EPS8作为Dvl1相关分子的鉴定”Biochem Byophys Res Commu。