The mechanism of osmotic adaptation in marine invertebraes. -Structural and functional characterization of taurine transporter

海洋无椎骨渗透适应机制。

基本信息

  • 批准号:
    11660204
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.24万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The aim of this study is to elucidate the high ability of osmo-adaptation of marine invertebrates by investigation into the function of taurine transporter of marine invertebrates.In the first year (1999), we investigated into the change in free amino acid in the oyster exposed to the change in the ambient osmolality, and indicated that taurine was most important as an osmdyte in the oyster. Therefore, we made an attempt to clone the gene coding taurine transporter from marine invertebrates. As a result, we cloned a partial cDNA fragment showing high homology with taurine transporter of mammals from the marine mussel, while we could not clone that from the oyster.In the second year (2000), we obtained the full length of cDNA of mussel transporter showing high homology with taurine and betaine/GABA transporter. In addition, as a result of northern blot analysis, it is indicated that de novo transcription of this gene is induced by both hypo- and hyper-osmolality.In the last year (2001), we made an attempt to make the substrate of cloned transporter clear. In order to analyze the substrate spedficity of cloned transporter, we examined uptake activity of [^3H]amino acids, taurine and [^<14>C]betaine in the transporter expressed in the Xenopus oocyte. As a result, cloned transporter expressed oocyte showed the uptake activity to taurine and it is indicated cloned cDNA codes taurine transporter. In this study, taurine transporter was cloned from marine invertebrate for the first time, and it's partidpate in osmo-adaptation wasindicated. Our result is the first step toward the elucidation of the high ability in osmo-adaptation of marine invertebrates.
本研究通过对海洋无脊椎动物牛磺酸转运蛋白功能的研究,阐明了海洋无脊椎动物对环境的高度适应能力,并在第一年(1999年)研究了环境渗透压变化对牡蛎体内游离氨基酸的影响,表明牛磺酸是牡蛎体内最重要的渗透压调节剂。因此,我们尝试从海洋无脊椎动物中克隆牛磺酸转运蛋白基因。结果,我们从贻贝中克隆到了与哺乳动物牛磺酸转运蛋白同源性较高的部分cDNA片段,而从牡蛎中未能克隆到,第二年(2000年),我们获得了贻贝转运蛋白的全长cDNA,其与牛磺酸和甜菜碱/GABA转运蛋白同源性较高。另外,北方杂交分析表明,该基因的从头转录受低渗透压和高渗透压的诱导。为了分析克隆的转运蛋白的底物特异性,我们检测了爪蟾卵母细胞表达的转运蛋白对[^3H]氨基酸、牛磺酸和[^<14>C]甜菜碱的摄取活性。结果表明,克隆的牛磺酸转运蛋白表达的卵母细胞具有摄取牛磺酸的活性,表明克隆的cDNA编码牛磺酸转运蛋白。本研究首次从海洋无脊椎动物中克隆了牛磺酸转运蛋白,并指出了其在海洋适应中的分布。我们的研究结果是第一步,对海洋无脊椎动物的高能力的适应性的阐明。

项目成果

期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hosoi M, Toyohara T, Hayashi I.: "Subtractive cloning of hypo-osmotic responsive gene in Mytilus"Fisheries Sci. (in press). (2002)
Hosoi M,Toyohara T,Hayashi I.:“贻贝低渗透压反应基因的消减克隆”渔业科学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hosoi M, Goto C, Takeuchi K, Kubota S, Sakaguchi M, Hayashi I, Yokoyama Y, Toyohara H.: "Amino acid transporter of mussel"Comp. Biochem. Physiol.. 126A Suppl. 1. S70 (2000)
Hosoi M、Goto C、Takeuchi K、Kubota S、Sakaguchi M、Hayashi I、Yokoyama Y、Toyohara H.:“贻贝的氨基酸转运蛋白”Comp。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hosoi M, et al.: "Amino acid transporter of mussel"Comp. Biochem. Physiol.. 126A Suppl. 1. S70 (2000)
Hosoi M 等人:“贻贝的氨基酸转运蛋白”Comp。
  • DOI:
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  • 作者:
  • 通讯作者:
Goto C, et al.: "Amino acid transporter of oyster"Comp. Biochem. Physiol.. 126A Suppl. 1. S63 (2000)
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  • 作者:
  • 通讯作者:
Goto C, Hosoi M, Takeuchi K, Kubota S, Sakaguchi M, Hayashi I, Toyohara H.: "Amino acid transporter of oyster"Comp. Biochem. Physiol. 126A Suppl. 1. S63 (2000)
Goto C,Hosoi M,Takeuchi K,Kubota S,Sakaguchi M,Hayashi I,Toyohara H.:“牡蛎的氨基酸转运蛋白”Comp。
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