内分泌攪乱物質が核内受容体の標的遺伝子転写活性に与える影響の分子機構の解析

内分泌干​​扰物影响核受体靶基因转录活性的分子机制分析

• 批准号: 11839032
• 负责人: 臼井 健
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Research Institute for Production Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11839032/
• 关键词: 内分泌撹乱物質; 核内受容体; 生薬; ビスフェノールA; 転写活性; 培養細胞

今年度は、各種核内受容体とGAL4のDNA結合領域(GAL4DBD)とのキメラプラスミドの構築を完成した。これらのプラスミドをGAL4-Luciferaseレポーター遺伝子(GAK-Luc)およびコントロールプラスミド(pRL-SV4,pRL-TK)とともに培養細胞(tsA201)に導入し、各種漢方薬生薬成分および化学物質ピスフェノールAを添加してレポーター活性(ルシフェラーゼ活性)の変化をルミノメーターにて検討した。その結果、培養細胞系において、いくつかの生薬に、エストロゲン受容体(Erα)、ビタミンD受容体(VDR)、PPARγに対して、疑似リガンドと成り得る成分が含まれている事が明らかになった。これらはいずれも培養細胞系において用量依存的にレポーター遺伝子の活性を上昇させた。これらの生薬成分に関してこれらに含まれる既知の化学物質について更に検討を加えて、内分泌作用を示す物質を同定する。このことは漢方薬の生薬成分にいわゆるpytoestogen(植物エストロゲン)様作用を有する成分が含まれている可能性を示すのみならず、種々の核内受容体に対して作用しうる成分が含まれている可能性を示唆するものである。一方甲状腺ホルモン受容体に対しては、甲状腺ホルモンに対してアンタゴニスチックに作用する生薬成分が存在した。またビスフェノールAはこれまで知られている、エストロゲン作用に加えて、甲状腺ホルモン受容体に対してアンタゴニスチックに作用する可能性が示唆された。

This year, the construction of various nuclear receptors and GAL4 DNA binding domain (GAL4DBD) was completed. GAK-L uc)およびコントロールプラスミド(pRL-SV4,pRL-TK)とともに cultured cells Cell (tsA201) is introduced, and various Kampo Herb ingredients are used as chemical substances. Add the してレポーターActivity(ルシフェラーゼActivity) to the の変化をルミノメーターにて検した.その results, cultured cell lines において, いくつかの生薬に, エストロゲン acceptor (Erα), ビタミンD acceptor Body (VDR), PPARγに対して, suspected リガンドと成り得るComponents containing まれている事が明らかになった.これらはいずれもCultivated cell lines においてThe activity of にレポーター漝子のをincreases させた depending on the dosage. The ingredients of これらの生薬に关してこれらに contain まれる are already known chemical substances, and the について has been updated, and the endocrine effects have not been shown, and the substances have been determined together.このことはKampo 薬の生薬Components にいわゆるpytoestogen(Plant エストロゲン)様 Effect を有するComponents がcontains まれているpossibility すのみならず、kind 々のnuclear receptor に対してeffect しうるcomponent がcontaining まれているpossibility をshows 唆するものである. One of the ingredients of thyroid gland receptor and thyroid gland receptor is present.またビスフェノールAはこれまで知られている、エストロゲンeffectに加えて、A The function of the glandular receptor is the possibility of action and the possibility of action.

项目成果

Nakamura Y.,Usui T.,Nakao K.et al.: "Characterization of Prophet of Pit-1 gene expression in normal pituitary and pituitary adenomas in humans"Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 84. 1414-1419 (1999)

Nakamura Y.、Usui T.、Nakao K.等人：“人类正常垂体和垂体腺瘤中 Pit-1 基因表达的 Prophet 特性”临床内分泌与代谢杂志。